宁天一 王婷婷 姜 静 程嘉艺

(辽宁中医药大学，沈阳，110032)

气滞血瘀证是指气机阻滞而致血行瘀阻所表现的证候。常因情志不遂，闪挫外伤或寒邪内阻等所引起。临床表现胸胁胀满或走窜疼痛，性情急躁，胁下痞块，刺痛拒按，入夜更甚，或妇女痛经，经色紫暗，夹有瘀块，舌紫暗或有瘀斑等。气是人体内至精至微的生命物质，是生命活动的重要物质基础，具有推动血液的生成、运行，以及津液的生成、输布和排泄等功能。中医“气”的概念较难把握，但“气”毕竟是物质的，有其物质基础才能完成其重要功能。为了初步探讨 “气”的本质与气体信号分子的相关性，本实验复制气滞血瘀病症模型，观察其模型体内气体信号分子NO的变化情况，研究是否与中医理论中的“气”存在相关性，为血瘀证及活血化瘀方药的研究提供一个新的思路。

1 材料与方法

1.1 试剂 NO试剂盒(20111123)、NOS试剂盒(20111123)(南京建成生物工程研究所)，Trizol(D9108A)、RT－PCR试剂盒(DRR019A)、琼脂糖(D601)、Marker(D526A)引物(宝生物工程(大连)有限公司)。

1.2 实验动物与分组 SPF级健康wistar大鼠，雌雄各半，体重180g～200g，随机分成4组，分别为对照组、模型组、血府逐瘀汤低剂量组和高剂量组。

1.3 复制模型 采用多因素联合刺激法造模［1］。刺激因素包括声、光、电、冰水浴、束缚、夹尾，每天刺激2次，持续5周时间。

1.4 血浆NO含量测定 NO产生后在体内迅速转化亚硝酸盐(NO2－)和硝酸盐(NO3－)，而 NO2－又进一步转化为NO3－。利用硝酸还原酶特异性地将NO3－还原NO2－，通过显色深浅测定 NO2－浓度高低［2］。

1.5 肝组织TNOS和iNOS活性测定 按NO和NOS检测试剂盒说明书操作，测定NO合酶(TNOS)、诱导型NO合酶(iNOS)活性，结构型NO合酶(cNOS)活性=TNOS活性－iNOS活性。……