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用高效液相色谱法鉴别小叶菝葜

2013-09-13黄慧莲刘丽莎刘荣华舒积成

世界中医药 2013年1期

黄慧莲 刘丽莎 刘荣华 邵 峰 任 刚 舒积成 林 涛

(江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,南昌,330004)

小叶菝葜为菝葜属植物小叶菝葜Smilax microphylla C.H.Wright的根茎,其味甘、苦,性平,临床上普遍用于治疗痛风性关节炎、支气管炎、肺结核咳嗽等疾患。现代药理研究表明,口服小叶菝葜提取物可以明显促进高尿酸血症模型大鼠的尿酸排泄,降低血液中的尿酸水平[1-2]。我们在本试验对4种小叶菝葜进行考察,通过对高效液相色谱图进行分析比较,可为其鉴别研究提供一定的参考。

1 仪器与试药

Agilent Technologies 1200 Series高效液相色谱仪(G1322A在线脱气、G1311A四元泵、G1316A TCC、G1314B VWD)(美国Agilent公司);实验用小叶菝葜(样品编号为1~4)分别采自湖南省永顺县、桑植县、保靖县及古丈县,经江西中医学院赖学文副教授鉴定为小叶菝葜。

2 方法与结果[3-5]

2.1 色谱条件

色谱柱:Thermon C18(250 mm × 4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈 -0.2%磷酸水梯度洗脱,分析时间82min,浓度梯度为0~15min(5% ~15%),15~55min(15% ~25%),55~82min(25% ~60%);流速为1.0mL·min-1;检测波长为330nm;柱温为35℃;进样量为10μL。

2.2 供试品溶液

分别取各药材适量,粉碎,过3号筛,精密称取3.0g,置25mL具塞锥形瓶中,加入10mL甲醇,密塞,称重,超声(工作频率80kHz)提取60min,放置冷却,补足重量,用0.22μm微孔滤膜过滤,即得。

2.3 测定方法

精密吸取供试品溶液10μL,注入液相色谱仪,记录82min的色谱图。

2.4 方法学考察

2.4.1 空白试验 精密吸取空白溶液10μL,注入高效液相色谱仪,按“2.1”项下规定的梯度条件洗脱,结果表明空白不干扰测定。

2.4.2 精密度考察 取样品编号为2的小叶菝葜1份,制备供试品溶液,重复进样6次,记录色图谱,考察各共有峰的相对保留时间以及相对峰面积比值的一致性,结果显示,共有峰的相对保留时间的RSD值均小于0.2%,相对峰面积的RSD值均小于3.8%,色谱峰的相似度高于0.994,表明该方法精密度良好。……

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