离子交换色谱法分离纯化胸腺肽α1的工艺研究
2013-09-05刘妍妍刘茗飞高薇张丽萍
刘妍妍,刘茗飞,高薇,张丽萍
(1.黑龙江八一农垦大学食品学院,黑龙江大庆 163319;2.吉林大学生物与农业工程学院,吉林长春 130022)
离子交换色谱法分离纯化胸腺肽α1的工艺研究
刘妍妍1,2,刘茗飞1,高薇1,张丽萍1,2
(1.黑龙江八一农垦大学食品学院,黑龙江大庆 163319;2.吉林大学生物与农业工程学院,吉林长春 130022)
摘 要:通过对胸腺肽α1的分离纯化,提高胸腺肽α1的纯度,确定简单可行的纯化工艺技术。将QAE Sephadex A-25和D208、D301、717等阴离子交换介质进行静态吸附实验,确定最适离子交换介质;通过L9(33)正交试验对流速、填料高度及进样浓度进行优化,确定最佳分离条件。以QAE Sephadex A-25作为填料介质吸附胸腺肽α1,在流速60 cm/h,填料高度50 cm,进样浓度8 mg/mL条件下,胸腺肽α1纯化效果理想,经HPLC测定,得到纯度达24.596 6 mg/mL的胸腺肽α1,质量分数达12.03%,比市场上销售的胸腺肽中Tα1含量(质量分数0.6%~1.0%)高出近10倍。
关键词:胸腺肽α1,离子交换色谱,分离纯化
胸腺肽是胸腺组织上皮细胞分泌的分子量在10 000 u以下的多肽激素[1],是一种重要的生物反应调节剂。它广泛地存在于脊椎动物的组织中,例如牛、猪、羊、鼠以及人类,在它们的胸腺、脾、心脏、肝脏中分布,其中要属胸腺中含量最高[2]。胸腺肽中活性最高的多肽为胸腺肽α1(thymosin α1)又简称Tα1,具有较高的免疫增强活性,同时还具有刺激血管内皮细胞迁移、促进血管生成和伤口愈合等作用,已用于乙型肝炎、丙型肝炎、恶性肿瘤以及免疫缺陷疾病等的临床治疗和研究中[3]。
目前,获得高纯度胸腺肽α1可以利用生物提取法、基因工程法、化学合成法三种途径进行生产,其中基因工程法具有高效表达的技术难题,尚处在实验室研究阶段;……
