七氟烷预处理联合后处理对大鼠心肌缺血再灌注时HO-1表达的影响
2013-08-22贺建东韩冲芳董玥颖雒珉王晓鹏
贺建东 韩冲芳 董玥颖 雒珉 王晓鹏
心肌缺血再灌注损伤常在进行冠状动脉旁路移植术、急性心肌梗死溶栓术及CPB下心内直视手术等治疗时发生。研究表明,七氟烷预处理、后处理及两者联合处理均可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,具体机制尚未完全阐明[1-3]。研究表明,血红素氧合酶-1(HO-1)基因转染可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤[4]。本研究拟评价七氟烷预处理联合后处理对大鼠心肌缺血再灌注时HO-1表达的影响,为明确七氟烷的心肌保护作用机制提供参考。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康成年雄性SD大鼠40只(山西医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(晋)2009-0001),体重250~280 g。仪器:七氟烷挥发罐(aeommedvp 3000),ALC-V 8动物呼吸机(上海奥尔特生物科技有限公司),麻醉气体监护仪(vamos,德国Draeger Medical AG&Co.KgaA)。
1.2 主要药品和试剂 (1)主要药品:七氟烷(sevoflurane,批号:9520,丸石制药株式会社);(2)试剂:CK-MB试剂盒(上海罗氏公司),HO-1兔抗鼠多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司bs-0827 R),PV-6001二步法免疫组化检测试剂(北京中杉金桥生物技术有限公司)。
1.3 模型制备 实验前动物禁食8 h,自由饮水,10%水合氯醛0.3 mL/kg行腹腔注射麻醉,仰卧位固定,针状电极连续监测标准肢体导联心电图。颈部正中切口,分离气管,气管切开,连接动物呼吸机行机械通气,呼吸频率60次/min,潮气量6~7 mL,吸∶呼=1∶2,吸入纯氧,氧流量为1 L/min,麻醉气体监护仪与气管导管连接,用于监测呼气末七氟烷浓度,七氟烷挥发罐与动物呼吸机进气端连接,用于调节吸入七氟烷的浓度。在左侧胸壁胸骨左缘0.5 cm处第3、4肋间打开胸腔,剪开心包,暴露心脏。……
