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Pv MSP1-19重组蛋白体外对间日疟患者外周血T细胞免疫功能的影响

2013-08-21李光友陶志勇

中国人兽共患病学报 2013年2期

李光友,夏 惠,陶志勇,陈 勇,方 强

2.安徽省芜湖市第二人民医院检验科,芜湖 241001

疟疾是严重危害人类健康的寄生虫病之一。据世界卫生组织2009年全球疟疾报告,全球有约2.5亿人发病,近90万人因疟疾感染而死亡。由于疟疾红细胞内期疫苗能通过抑制裂殖子侵入红细胞,降低疟原虫密度,从而能减少间日疟的临床发病,同时也起到间接抑制疟疾传播的作用[1]。疟原虫裂殖子表面蛋白1(Merozoite surface protein 1,MSP-1)是一种表达于裂殖子表面的蛋白,参与裂殖子对红细胞的入侵。重组MSP1-19与自然感染间日疟原虫患者的血清具有很强的免疫反应性[2]。因此其作为疟疾防治的重要疫苗候选分子引人关注。据此,本文用纯化的MSP1-19重组蛋白刺激间日疟既往感染者外周血T细胞,以分析其对T细胞的免疫功能的影响。

1 材料与方法

1.1 实验对象 安徽北部地区半年内间日疟既往感染者11例,年龄20~70岁(平均45岁),其中男性5例,女性6例。所选间日疟既往感染者均排除肝炎与结核病史。

1.2 主要试剂和设备 淋巴细胞分离液购自天津TBD生物技术公司,重组人白细胞介素-2(IL-2)购自长春长生基因药业公司,新生小牛血清购自杭州四季青生物公司,RPMI 1640购自美国GIBCO公司,荧光抗体IFN-γ-FITC,IL-4-PE,CD4-PeCy5.5,CD3-APC购自美国Caltag Laboratories公司,莫能霉素(Monensin,Mo)购自美国 Sigma-Aldrich公司,CFSE购自美国Molecular Probes公司,流式细胞仪FACSCalibur购自美国BD公司,纯化的PvMSP1-19重组蛋白系本室自制。

1.3 方法

1.3.1PvMSP1-19重组蛋白体外刺激间日疟既往感染者T细胞分泌细胞因子效应的分析 取间日疟既往感染者肝素抗凝血,按常规方法分离单个核细……

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