微小巴贝虫在不同免疫状态小鼠体内消长规律研究
2013-08-21蔡玉春陈韶红陈木新田利光张玲玲陈家旭
蔡玉春,卢 艳,陈韶红,郭 俭,陈木新,田利光,张玲玲,周 洋,陈家旭
2010年河南、安徽等地发生因蜱虫叮咬引发人相关疾病流行的报道引人关注。蜱可传播多种疾病,已经确认经蜱叮咬感染人的巴贝虫只有4种,即:微小巴贝虫(Babesiamicroti)也称田鼠巴贝虫;牛巴贝虫(B.bovis),歧异巴贝虫(B.divegen);和马巴贝虫(B.equi),至少还有3种未定种的巴贝虫也可以感染人体。其中以微小巴贝虫感染为多见[1-8]。本文以引进的微小巴贝虫建立动物模型,观察其在不同免疫状态动物体内的动态规律,为巴贝虫病致病机制、诊治技术及防控措施等研究奠定研究基础。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 虫株 微小巴贝虫(Babesiamicroti),peabody mjr株购自美国模式培养物集存库(American type culture collection,ATCC),货号:PRA-99
1.1.2 实验动物 BALB/c小鼠、严重联合免疫缺陷小鼠(severe combined immune deficiency,SCID)、非肥胖糖尿病/重症联合免疫缺陷小鼠(nonobese diabetic/severe combined immunodeficient,NOD/SCID)均购自中科院上海实验动物中心。
1.2 仪器和试剂 显微镜(日本奥林巴斯公司),EDTA抗凝采血管(浙江拱东医疗科技有限公司),0.9%生理盐水(上海长富制药公司),地塞米松(山东新华制药公司),吉姆萨染液原液(上海怡成生物科技公司),甲醇(上海振兴化工一厂)。
1.3 试验方法
1.3.1 BALB/c小鼠免疫抑制 3周龄雌性BALB/C小鼠腹腔注射地塞米松,0.5 mg/只,连续注射5 d。
1.3.2 动物接种 感染种鼠(红细胞染虫率,即虫密度为60%)眶窦取血,置EDTA抗凝采血管中,在无菌条件下以1∶3比例加0.9%生理盐水,使虫密度约为20%,腹腔接种正常BALB/c小鼠、免疫抑制BALB/c小鼠、SCID小鼠以及NOD-SCID小鼠,100μL/只,每组5只,4只接种鼠,1只为正常鼠。
1.3.3 薄血片吉姆萨染色 从接种当天及接种后每天尾部采血涂制薄血片,吉姆萨染色镜检观察红细胞染虫率。……
