张瑞妮，吾拉木·马木提，于春洋，法蒂玛·木特力甫

细粒棘球绦虫（Echinococcusgranulosus）感染狗等犬科动物是人体囊型包虫病的主要传染源，因此犬感染细粒棘球绦虫情况的动态监测、合理驱虫治疗是预防和防制包虫病流行的关键性措施之一，而筛选具有较高特异性的有效抗原成分是运用粪抗原检测方法快速诊断棘球绦虫感染犬的重要前提。抗原B（AgB）是包虫囊液中主要的分泌性抗原成分，由一组大小约8 k D左右的同源性较高的亚单位（抗原B 8k D亚单位）聚合形成的分子量为120～160 k Da的耐热性多聚蛋白，并被认为是目前用于包虫病免疫学诊断中具有较高敏感性和特异性的抗原之一。现已发现抗原B 8 k D亚单位由AgB8/1、AgB8/2、AgB8/3、AgB8/4、AgB8/5等5个基因表达［1－3］。Mamuti等［4－6］研 究 发 现 细 粒 棘 球 绦 虫 的AgB8/3（Eg AgB8/3）在棘球绦虫成虫阶段出现大量表达现象。且Eg AgB8/3是虫体分泌性蛋白，可随感染犬的粪便排出体外，易于被检测，有望成为ELISA夹心法诊断棘球绦虫感染犬粪抗原检测的候选靶蛋白。为此，陈洁等［7］利用 Trx－Eg AgB8/3重组蛋白制备多克隆抗体具有较高的敏感性和特异性，但还是与9%的犬复孔绦虫自然感染犬粪出现了交叉反应，这很可能归因于融合表达的TRx造成的非特异性交叉反应，为克服交叉反应，本研究应用融合标签自剪功能的表达载体p TWIN1对Eg AgB8/3进行了表达纯化并鉴定其生物学活性。通过几丁质柱将融合蛋白的纯化和融合标签自剪切一步完成并可自动释放目的蛋白r Eg AgB8/3多肽，无需借助外源蛋白酶，从而节省了时间和成本，并为后续具有较高特异性抗体的制备和运用粪抗原检测方法诊断棘球绦虫感染犬奠定了基础。……