何育英 蔡巧青

1.深圳市盐田区盐田街道计生中心,广东深圳518000;

2.深圳市北京大学医院妇产科,广东深圳518000

反复自然流产(RSA)是妇产科常见病,约40%～60%不明原因,指连续2次及以上的自然流产.目前多数研究表明,母体免疫系统能否识别并耐受胚胎抗原是关键.大量研究结果显示,正常妊娠中母体对胚胎的免疫反应以Th2体液免疫为主,而Th1细胞免疫过强极有可能导致流产.为探讨研究外周血淋巴细胞亚群Th1/Th2的水平及其细胞因子德变化和临床意义,辅助临床治疗.现回顾性分析该院2010年10月-2011年10月收治的60例妇女的临床资料,将结果报道如下.

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取在深圳市盐田区计生中心经过妇检,B超,尿HCG都正常无不孕,无死胎或流产史,要求人流的妇女30例为正常早孕组.同期经我中心排除因遗传,感染及血型不合,抗精子抗体阳性等因素,确诊为RSA的妇女30例为病例组.见表1.

表1 两组妇女临床资料比较

1.2 设备及试剂

采用BeckmanCoulter FC500及其原装试剂,利用表面分子将其分类细胞.ELISA试剂盒购自美国GBD公司.

1.3 标本收集

分析前收集RSA组和对照组孕妇空腹取静脉血5 mL,注入5.0 mL于EDTA.K2管,空腹静脉血4 mL,分离血清,-20℃保存待检测.严格按照操作程序.

1.4 统计方法

采用SPSS13.0统计学处理软件包进行数据分析,计量资料采用均值±标准差(±s)表示,进行t检验.

2 结果

2.1 病例组与对照组资料比较

表2 对照组与病例组比较

表3 对照组与病例组外周血IFN-γ、IL-10水平的检测(pg/mL)

3 讨论

大多认为早期妊娠母体对胚胎的免疫耐受主要有以下:①妊娠期对母体免疫反应的抑制.②胎盆的屏障作用可将胚胎抗原封闭,避免与母体免疫接触,同时将母体抗体及其免疫因子进入胎儿导致免疫反应隔离.Greco等[1]分别把妊娠与产妇,男性与未孕的女性的外周血淋巴细胞在体外与胎盘生物制剂进行MLC培养,发现前者可令淋巴细胞转化而后者不能,证实了早孕期间的免疫耐受是动态的.相关研究结果显示:"免疫细胞分泌的细胞因子影响胚胎的着床、发育,生殖的神经内分泌以及胎盘功能,以维持正常妊娠活动".

Th1细胞分泌IL-2,TNF-α,IFN-γ等,引起局部炎症反应和迟发细胞免疫反应,Th2细胞分泌IL-4,IL-5,IL-6,IL-10等,引起体液免疫促进B细胞增殖和抗体形成.Piccinni等[2]报道,孕鼠胎盘IL-4比血中高5-10倍.而流产鼠胎盘IL-4等浓度相对低,但IL-2,TNF-α,IFN-γ等浓度高.Makhseed等[3]对流产倾的妇女进行实验研究,发现其成功怀孕组以Th2型的细胞因子为主,而失败的以Th1型的细胞因子为主.Th1型细胞因子通过直接或间接激活NK、细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)、巨噬细胞等多种毒性细胞妨碍妊娠.Th2型细胞因子主要是通过抑制Th1型细胞因子的产生及其作用来维持妊娠,大部分反复自然流产均是由于患者机体不能产生足够的Th2型细胞因子来抑制Th1型细胞因子所致.国内刘庆之等[4]对此亦有论述.

大量研究表明Th2淋巴细胞有利于妊娠,而Th1则相反.但需注意适量的Th1型细胞是有利于促进胎儿生长和母体抗感染能力.Haynes等[5]认为,对妊娠来说,Th1与Th2的平衡更应该考虑.现已证实,Th2型细胞因子对维持正常妊娠起重要作用,而Th1型细胞因子则不利于妊娠的正常进行[6];两种细胞因子之间的平衡对维持正常妊娠发挥重要作用.正常妊娠时Th1/Th2的比值下降,母体免疫反应偏离Th1型而偏向Th2型.在RSA中Th1/Th2比值上升,母体免疫反应呈相反变化.可见,细胞因子自身、与妊娠有关的激素、感染等因素均对两型因子间平衡起重要调节作用

该研究主要从淋巴细胞的表面分子和淋巴细胞因子进行实验研究,发现RSA的患者和IFN-γ相对正常妊娠妇女表达增强,而,和IL-10表达相对较弱.提示正常妊娠为一种特殊的Th2现象,Th1受到抑制.陈巧儿[7]等报道,RSA患者经过免疫治疗后,促进机体向Th2淋巴细胞转化,利于妊娠成功.综上所述,利用流式细胞仪对RSA快速诊断,结合运用淋巴细胞免疫治疗[8]或者给予细胞因子如Th2类因子制剂或抗Th1类因子制剂,调节优势应答的类型,达到早预防,早治疗,达到妊娠成功的目标.

[1]Greco CR,Koncurat MA.Different responsen of lymphocyte to huaman placenta conditioned medium in vitro[J].J Investig Clin Immumol,1998,8(1):42-45.

[2]Piccinni MP,Romagnana S.Regulation of fetal allograft survival byhormone-controlled[J].Th1-and Th2-type cytokines immonol Res,1996,15(2):141-150.

[3]Makhseed M,Raughupathy R,Azizieh F,et al.Th1 and Th2cytoline profiles in recurren aborters nwith successful pregnancy and with subsequent abortions[J].Hum Reprod,2001,16(10):2219-2226

[4]刘庆芝,黄山鹰姚吉龙,等.反复自然流产患者外周血中Th1/Th2型细胞因子的表达及其意义[J].东南大学学报,2011,30(4):565-568.

[5]Haynes MK,Smith JB.Can Th1-like immune responses esplain the immuno-pathology of recuurent miscarriage[J].Reprod Immunol,1997,35(1):65-71.

[6]Rezaei A,Dabbagh A.T-helper(1)cytokines increase during early pregnancy in women with a history of recurrent spontaneous abortion[J].Med Sci Monit,2002,8(8):607-610.

[7]陈巧儿,秦卫兵,杨宁,等.免疫治疗原因不明反复自然流产后Th1/Th2型细胞因子和NK细胞的变化[J].中国妇幼保健,2005,20(20):2637-2639.

[8]廖丹,李凤英,谭秋慧,等.淋巴细胞免疫治疗反复早期自然流产53例[J].临床医学,2009,29(1):75-76.