李 杰，李前瑞，田婷婷，许君艳，姚运亮，陈德坤

（西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌712100）

羊口疮（又称羊传染性脓疱）存在于大部分养羊国家［1］。该病多发于4月龄～6月龄羔羊，发病羔羊因口唇溃烂而采食困难，严重影响羔羊生长发育，甚至引起继发性感染，病死率可达到20%～50%［1-2］。随着近年来我国养羊数量的迅速增加，羊口疮疫情越来越多，给养羊户造成了严重的经济损失。环境中羊口疮病毒或者带毒成年羊均是本病发生的传染源，因而准确快速的羊口疮病毒检测技术对羊口疮疫情监测至关重要。目前常用的羊口疮血清学检测方法包括ELISA、琼脂双扩散试验、免疫荧光技术等［3-4］，其中ELISA方法具有操作简便、敏感性和特异性强等优点。但已有的羊口疮ELISA检测方法中均使用完整的病毒粒子做为包被抗原［5］，存在包被抗原制备繁琐困难，以及感染操作人员和污染环境等风险，因而有必要对其进行改良。

羊口疮病毒基因组中存在B2L和VIR两种主要保守性基因。B2L基因是结构基因，其编码的蛋白是羊口疮病毒的保护性抗原之一［6-7］。VIR基因即干扰素抑制基因，可抑制干扰素的抗病毒活性［8-9］。不同分离株VIR基因编码的氨基酸序列相似性为92%～94%［10］，B2L基因编码氨基酸序列的相似性为97.1%～98.7%［11］，这两种蛋白都可刺激机体产生高效价的抗体［9，12］。据此，可以选择这两种蛋白作为包被抗原［13］，用以测定机体羊口疮病毒抗体的ELISA效价。

本研究以羊口疮病毒细胞毒DNA基因组为模板，扩增B2L和VIR基因，通过原核表达系统获得其原核表达蛋白，对重组蛋白的抗原性进行鉴定，所获得结果为改良羊口疮ELISA诊断方法提供有价值的参考依据。……