银杏叶提取物对db/db糖尿病小鼠胰岛功能的影响
2013-08-14刘春燕易秋艳刘艳清王昕怡王英之杰邵加庆
刘春燕,张 珍,易秋艳,刘艳清,王昕怡,卢 斌,王英之杰,邵加庆
(本文编辑:张仲书; 英文编辑:王建东)
银杏叶提取物EGb761是目前国内外治疗缺血性心脑血管病中的常用药物,在对合并糖尿病的心脑血管疾病的临床和基础研究中,有学者发现EGb761能显著改善血糖水平[1-2]、保护胰岛 β 细胞[3],这为糖尿病的治疗提供了一种新的治疗手段,但其防治糖尿病的机制尚未明确。本研究采用db/db小鼠,通过观察EGb761干预对胰岛分泌功能和胰岛内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶表达水平的影响,探讨EGb761改善糖尿病的可能机制。
1 材料与方法
1.1 动物 选取10只8周龄清洁级雄性C57BL/KsJ-db/db小鼠[许可证号SCXX(苏)2007-0012],体重约20~25 g,喂养于清洁屏障设施内,环境温度保持在23℃,12~12 h亮暗周期,自由摄取食物和饮水。动物的处置均遵循实验动物看护原则(NIH Publication No.85-23,修订于1985年)。
1.2 方法 将10只db/db小鼠随机分为观察组(EGb761组)、糖尿病对照组(db/db组),每组各5只,分别给予8周的EGb761[GINATON(金纳多),德国的施瓦伯制药集团],100 mg/(kg·d)和安慰剂(5%阿拉伯胶)灌胃,另选取5只同周龄同窝出生的db/m小鼠作为非糖尿病对照组(db/m组),给予安慰剂灌胃。
1.3 实验仪器、材料 血糖仪[One Touch Ultra,强生(中国)医疗器材有限公司]、血糖试纸(lifescan公司,美国)、光学显微镜(尼康 E800,日本)、豚鼠抗人胰岛素抗体(1∶2000,LINCO公司,美国)、山羊抗人 p22phox、gp91phox 抗体(1∶100,Santa Cruz生物技术公司,加拿大)、生物素化山羊抗豚鼠IgG抗体(1∶1000,Chemicon 公司,加拿大)、生物素化兔抗山羊IgS抗体(1∶200)与生物素化山羊抗小鼠IgS抗体(1∶200,Dako 公司,日本)。
1.4 检测指标
1.4.1 相关生理指标检测 每周监测小鼠体重和随机血糖,投药前和投药8周后测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FSI)、并计算葡萄糖和胰岛素曲线下面积及胰岛素敏感指数。……
