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针刺足三里与血管活性药物对失血性休克大鼠细胞因子及生存率的影响比较*

2013-07-20张中军孙立忠江苏无锡市第三人民医院麻醉科无锡214041

陕西中医 2013年10期
关键词:失血性多巴胺休克

李 倩 支 平 张中军 孙立忠 江苏无锡市第三人民医院麻醉科(无锡214041)

严重战、创(烧)伤后会导致低血容量休克,造成组织细胞代谢障碍和生命脏器功能损害,且由于环境恶劣、交通破坏、医疗资源匮乏等条件的限制,常使休克手段(如输血、输液)难以及时实施,从而使阵亡率、病死率或并发症的发生率大大增加[1]。针灸是一种运用针刺作用于腧穴以治疗疾病的方法,其所需器械易得易携,操作简单,是中医学中治疗厥脱等急症的重要治疗手段。因此将针灸医疗列入现代抗休克的院前救治技术的一种,并加以系统研究具有重要的现实意义。

1 实验材料

1.1 实验动物及饲养 采用健康SD 大鼠为实验动物60只,清洁级,60~70d龄,体重(290±11)g,体长(19.9±1.4)cm雄性,所有实验动物购于中国科技研究院上海实验动物中心。

1.2 实验仪器与试剂 MSE-25型高速冷冻离心机(北京京立离心机有限公司生产),LAUDA-C3 型循环恒温水浴箱(上海迈捷实验设备有限公司生产),LXJ-ⅡB型低速大容量多管离心机(上海安亭科学仪器厂生产);电针综合治疗仪(东西仪科技有限公司生产)。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1(IL-1)试剂盒购于军事科学院生物制品研究所。

1.3 方法 将大鼠按随机数字表法分为4 组,每组20只。除空白组外其他三组参考文献建立失血性休克大鼠的模型[2],采用45%失血量造模。大鼠用0.4mL/kg(盐酸氯胺酮注射液:速眠新Ⅱ注射液=2:1)腹腔注射麻醉后,行股静脉分离术并置管,用于全身肝素化、输液和抽血;总抽血量为大鼠全身总血量的45%,即失血性休克模型制作完毕。造模成功后,除模型组外,其他两组分别是针刺足三里组和盐酸多巴胺注射液组。针刺足三里组:参照大鼠腧穴据《实验针灸学》定位[3]。针刺时将大鼠清醒固定,用1 寸毫针,分别刺入各穴位的1~7mm 深度。然后接通电针综合治疗仪(频率:2赫兹,强度:1.0伏),治疗过程中,以大鼠下肢轻微抖动为佳,每次留针20min,于造模第1d开始针刺,连续针刺3d。盐酸多巴胺注射液组:对失血性休克给予腹腔注射2.0mg/kg盐酸多巴胺注射液,每次30min,连续注射3d。

1.4 检测指标与方法[4]细胞因子的检测于末次治疗后24h内,用3%的戊巴比妥钠lmL/kg体重腹腔内注射麻醉后,取主动脉血2mL,加入10% EDTA-Na230μL、抑肽酶10μL,混合均匀,经低速自动平衡离心机以2500r/min离心10 min,分离血浆,置于-20℃的冰箱内保存备用。采用酶联免疫吸附法(ELISA)对IL-1、IL-6、TNF-α水平进行检测,所有操作严格按照说明书进行。并分别于失血后6h、12h、24h观察大鼠的生存率。

统计学方法 采用SPSS16.0分析软件,计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,多组之间的均值比较采用F检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠体重及维持休克时所放血量比较 见表1。

表1 各组大鼠体重及维持休克时所放血量比较

血清IL-1、IL-6、TNF-α水平变化分析 见表2。

不同组大鼠生存率比较分析 见表3。

表2 血清IL-1、IL-6、TNF-α水平变化分析

表3 不同组大鼠生存率比较分析[n(%)]

3 讨 论 目前,临床在无静脉输液条件时,主要采用口服或经胃肠道补液、腹腔输液、骨髓腔输液或急救缺氧、生命维持等手段对患者进行救治;但通常情况下失血性休克患者均存在胃排空和肠吸收功能显著下降的现象[5],因而,口服或胃肠道补液的方法效果欠佳,甚至还有可能进一步恶化患者病情。虽然骨髓腔输液可得到有效的治疗,但其治疗价格昂贵,临床中较难广泛普及,临床应用中受到一定的限制。因而,研究无静脉输液条件时,有效的失血性休克治疗方法,对于院前救治技术的快速发展具有重要意义。

针灸疗法是我国传统中医学的主要技术之一,其所需器械易得易携,操作简单,疗效确切,其主要机制是通过调节人体自身机能而实现防病治病的效果。如果能将针灸应用于抗失血性休克的院前救治或自然灾害或战胜的救治中,将具有重要的现实意义。

失血性休克可归于我国中医“厥”、“脱”证范畴,主要病机为气血大虚、血厥阳厥、之证。足三里穴位于小腿外侧,髌骨和髌韧带外侧凹陷下3寸。中医认为足三里具有以下特点:①具有益气补虚之功效;②足三时为足阳明胃经的合穴,可靶向调节胃肠功能;③现代研究表明,电针足三里穴能激活胆碱能抗炎通路,同时,电针足三里穴还可以减轻内毒素引起的大鼠组织的促炎因子水平、减轻组织水肿和功能损害。

本研究结果显示,与模型组比较,针刺足三里组TNF-α、IL-6、IL-1水平均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);与盐酸多巴胺注射液组比较,针刺足三里组TNF-α、IL-6、IL-1水平均下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。说明针刺足三里能有效抑制机体的炎症反应,提高机体免疫力。同时,本研究中,失血6h、12h、24h时,针刺足三里穴组的大鼠生存率显著高于模型组,且与盐酸多巴胺注射液组比较,各时间点生存率也较高(P<0.05),说明针刺足三里治疗失血性休克的疗效显著,可提高失血性休克大鼠的存活率。

综上所述,针刺足三里治疗失血性休克的疗效显著,可有效抑制机体的炎症反应,提高机体免疫力,延缓失血性休克的发展进程,降低失血性休克大鼠的死亡率,值得应用。

[1] 高玉萍,牟亚琳.参附注射液在失血性休克早期复苏中的疗效观察[J].陕西中医,2012,33(2):149-151.

[2] Choi M,Jung J,Seo M,et al.Ultrasonographic observation of intestinal mobility of dogs after acupunctural stimulation on acupoints ST-36and BL-27.J Vet Sci.2011,2(3):221-226.

[3] 杨红梅,陈 洁,王 黎.灵芝多糖对失血性休克复苏时肠粘膜损伤的保护作用及机制[J].陕西医学杂志,2010,39(2):134-36.

[4] 石 现,张立俭,白慧颍,等.电针对脓毒症大鼠肝组织血流量和脂质过氧化的影响[J].中国针灸,2010,30(5):397-400.

[5] Lee CH,Kim DK,Yook TH,et al.Effectiveness of Electroacupuncture at Zusanli(ST36)on the Immunohistochemical Density of Enteroendocrine Cells Related to Gastrointestinal Function.J acupunct Meridian Stud.2012,5(2):63-71.

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