王汉平 杨志灵 魏桂芳 陕西省汉中市中医医院（汉中723000）

舒胆片收载于原卫生部药品标准《中药成方制剂》第二十册，具有清热化湿，利胆排石，行气止痛的功能，用于肝胆湿热，黄疸胁痛，发热口苦，尿赤便燥等症及胆囊炎、胆道感染、胆石症见上述证候的患者，具有显著的临床应用效果［1］。原标准制定于上世纪九十年代，由于历史条件所限，仅对部分药材制定了薄层鉴别项目，未制定定量控制项目，使得本产品的质量控制处于较低水平。厚朴是本品处方中的主药之一，其主要成分为厚朴酚及和厚朴酚等，但试验表明药材的含量测定方法不适合成品的检验［2］。为保证舒胆片的质量稳定，本实验建立了HPLC法测定舒胆片中厚朴酚及和厚朴酚含量的方法［3］。

1 仪器与试药 仪器：美国waters 515高效液相色谱仪，waters 2487双波长紫外检测器，戴安ASI－100自动进样器，浙大智达色谱处理工作站；赛多利斯BP－211D十万分之一电子天平；KQ－250DB超声处理仪。试剂：甲醇、乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为娃哈哈596mL瓶装纯净水；对照品厚朴酚（批号：110729－200411）及和厚朴酚（批号：110730－201011）购自中国药品生物制品检定所；舒胆片由陕西汉王药业有限公司生产。

2 方法与结果 2.1 对照品溶液的制备 精密称取厚朴酚对照品及和厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每1mL 含厚朴酚20μg及和厚朴酚10μg的溶液，即得。

2.2 供试品溶液的制备 取舒胆片50片，除去包衣，精密称定重量，求得平均片重。研成细粉，取约2g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加甲醇50mL，称定重量，在30℃下超声处理60min，放冷，再精密称定，用甲醇补足减失的重量。滤过，精密吸取续滤液5mL，置25mL的量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜（0.45μm）过滤，即得。

2.3 色谱条件 色谱柱：Thermo－BDS HYPERSILC18120A5μm，柱（4.6mm×250mm ）；流动相：甲醇－乙腈－水－磷酸（50∶19.31∶0.3）；柱温：30℃；流速：1.0 mL／min；检测波长294nm；理论塔板数按厚朴酚峰计算应不低于3000。

由于本实验采用厚朴酚及和厚朴酚两个成分的混合对照，先用加样法进行预试验，确定第一个峰（保留时间11.2min）为和厚朴酚，第二个峰（保留时间14.5min）为厚朴酚。然后进行下列试验。

2.4 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10μl进样，以进样量为横坐标，厚朴酚峰面积为纵坐标作图，得厚朴酚峰面积的线性回归方程y＝124000x＋20.8，r＝0.9992。厚朴酚在0.04～0.2μg的进样范围内具有良好的线性关系。再以进样量为横坐标，和厚朴酚峰面积为纵坐标作图，得和厚朴酚峰面积的线性回归方程y＝46750x＋17.2，r＝0.999 0。和厚朴酚在0.02～0.1μg的进样范围内同样具有良好的线性关系。故可以用外标法对厚朴酚及和厚朴酚两个成分进行计算。

2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液10μl，连续进样6次，测定厚朴酚峰面积，求得RSD 值为1.15%；再测定和厚朴酚峰面积，求得RSD 值为1.24%，均小于1.5%，符合药典要求。色谱图见图1。

2.6 重复性试验 取样品溶液10μl，连续进样6次，测定厚朴酚及和厚朴酚的峰面积，求得厚朴酚峰面积RSD 值为1.27%，和厚朴酚峰面积RSD 值为1.39%。均在1.5%以内，重复性符合要求。

2.7 样品测定 精密吸取样品溶液10μl，连续进样3次，用外标法计算，测定厚朴酚及和厚朴酚含量，分别计算厚朴酚及和厚朴酚的平均含量、平均含量的RSD 值，再计算厚朴酚及和厚朴酚的总含量。5批样品的测定结果见表1，色谱图见图2。

2.8 稳定性试验 分别在第一次样品进样后间隔2、4、6、8、10h时，精密吸取样品溶液10μl，进样测定，统计并计算各次进样所测定的厚朴酚峰面积的RSD 值，再统计并计算各次进样所测定的和厚朴酚峰面积的RSD 值，结果得到：厚朴酚峰面积的RSD＝1.36%，和厚朴酚峰面积RSD 值为1.49%。表明所测两成分均较稳定，可在一个班次内（按8h工作时间）检验。

2.9 回收率试验 精密称取已测知含量的舒胆片样品细粉适量，加入定量的厚朴酚对照品及和厚朴酚对照品，按2.2项下操作，得到回收率试验样品，测定其中厚朴酚及和厚朴酚的含量，分别计算厚朴酚及和厚朴酚的回收率，求得平均回收率为97.9%，RSD＝1.4%（n＝6），结果见表2。

表1 舒胆片中厚朴酚及和厚相酚含量测定试验结果

表2 厚朴酚及和厚相酚回收率试验结果

图1 厚朴酚及和厚朴酚HPLC图谱

图2 舒胆片HPLC图谱

讨 论 由于厚朴酚及和厚朴酚的理化性质相似［4］，本实验采用了同一色谱条件，同一样品处理方法，一次同时测定两个组份，简化了测定过程。使用混合对照品溶液时，一定要确认前后两个峰各是哪个成分，一般和厚朴酚在前，厚朴酚在后，但条件变化时最好再次加样确认或另配一单成分对照品溶液进行确认。经不同品牌的C18色谱柱对多批样品进行反复测试，证明本法的重现性较好，故可用于舒胆片的含量测定。试验所测5批样品的厚朴酚及和厚朴酚含量在每片1.2～1.4mg之间。但由于厚朴药材中厚朴酚及和厚朴酚含量差异较大，首先应对处方中的原料进行严格控制。鉴于本实验所测样品批次有限（只有5批），且5批产品为同一时期生产，样品的代表性不强，产品含量限度需做进一步研究。含量限度可暂定为：每片含厚朴以厚朴酚及和厚朴酚的总量计，不得小于1.0mg。

［1］ 崔爱珍.自拟舒肝通腑汤加减治疗慢性胆囊炎40例［J］.陕西中医，2009，30（1）：29.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010，235.

［3］ 王宝琹.中成药质量标准与标准物质研究［M］.北京：中国医药科技出版社，1994，23－31.

［4］ 南京中医药大学.中药大辞典［M］.上海：上海科技出版社，1986，1628－1630.