陈慧，徐琳瑜，钟晓怡，郜恒骏



双重免疫组化技术在乳腺癌组织芯片中的应用

陈慧，徐琳瑜，钟晓怡，郜恒骏

201203 上海芯超生物科技有限公司

在生物医学和临床研究实践中，经常需要检测两种不同物质是否在同一样品或同一种细胞中共存，最好使用双重染色法在同一个组织样本上进行杂交。双重染色的方法有两种类型，免疫酶组织化学和免疫荧光化学法。目前，在实体肿瘤中，由于甲醛固定石蜡包埋组织过高的荧光信号，免疫荧光法更适合用于冰冻保存的组织[1]。双重免疫酶组织化学需要选择不同显色底物、不同的抗体、不同修复方法进行搭配，操作繁琐，在科研使用比较广泛，但临床操作要求稳定性高、操作简单，所以在临床不常规使用。随着科技进步、技术发展，出现越来越多稳定性好、操作简单的试剂，可以解决上述问题。雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）、C-erbB-2、E-钙黏蛋白（E-cadhein）、p53 这些抗体大都是经典的抗体，纯度高，定位准确，不会出现因为定位不准确或非特异性表达导致对结果的判读误导。而乳腺癌细胞胞浆丰富，呈嗜酸性，伴有多个核仁且明显，且成片生长较容易区分。本实验通过在乳腺癌上表达定位准确、位置单一的抗体进行免疫组化单染和双染的比较，看是否存在结果上的差异，以探讨在临床上进行双重免疫组化的可行性和操作的难易程度，从而达到在临床上广泛应用的目的。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床资料 32 例乳腺癌标本取自生物芯片上海国家工程研究中心、上海芯超生物科技有限公司组织库国家 863 项目协作医院近 2 年新鲜手术切除及存档标本，患者均为女性，年龄 33 ~ 93 岁，中位年龄 55岁；……