林淑娴，杨芳芳，彭毅，李研，方毅敏，黎意芬，赖小敏



酶联免疫斑点法对抗结核治疗期肺结核患者多肽特异性IFN-γ的检测

林淑娴，杨芳芳，彭毅，李研，方毅敏，黎意芬，赖小敏

510080 广州，中山大学中山医学院微生物教研室，热带病防治研究教育部重点实验室，海洋微生物功能分子广东省高校重点实验室，广东省重大传染病预防和控制技术中心（林淑娴、杨芳芳、彭毅、李研、赖小敏）；510095 广州市胸科医院内科（方毅敏、黎意芬）

运用酶联免疫斑点法检测结核患者外周血 IFN-γ，探讨结核患者结核多肽特异性 IFN-γ 分泌水平随抗结核治疗的变化。

采用结核混合多肽 E6 + E7 + C14、E6 + E7 作为刺激抗原，对 331 个处于治疗前或 1、2、3、4、5 和 6 个月治疗期的肺结核患者外周血标本进行多肽特异性 IFN-γ 酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测。

治疗前的肺结核患者其 ELISPOT 阳性检测率均高于痰涂片和痰培养阳性率（E6 + E7 + C14-ELISPOT 92.5%、E6 + E7-ELISPOT 89.7%、痰涂片 41.0%、痰培养 59.0%），且差别均有统计学意义（< 0.010 和< 0.001）。在抗结核治疗各个时期，肺结核患者 IFN-γ-ELISPOT 检测阳性率和斑点数（spot forming cells/106cells, SFP）随着治疗的进行持续下降，由治疗前高水平（E6 + E7 + C14-ELISPOT 阳性率 92.5%、SFP 计数中值 M = 381；E6 + E7-ELISPOT 阳性率 89.7%、SFP 计数中值 M = 168）降至第 6 个月治疗结束时低水平（E6 + E7 + C14-ELISPOT 43.6%、M = 40；E6 + E7-ELISPOT 38.1%、M = 36）。痰涂阳性患者的 SFP 计数持续处在高位，且治疗 6 个月痰涂阳性患者的 SFP 计数显著高于痰涂阴性患者。

两种混合多肽 IFN-γ-ELISPOT 可提高结核患者的诊断率，同时检测抗结核治疗患者的 IFN-γ 分泌水平以监测抗结核治疗的效果。

结核，肺； 免疫酶技术； 细胞； 抗结核治疗

结核病是严重危害人类健康的呼吸道传染病，全球大约有三分之一的人口感染过结核分枝杆菌（，MTB）[1]。根据世界卫生组织的最新数据，结核病是引起人类死亡的第二杀手[2]。我国既是结核病高负担国家，也是耐多药结核病流行严重国家。监测抗结核治疗患者的治疗效果，根据效果及时调整治疗方案，有利于防止耐药菌株的出现。酶联免疫斑点试验是一种基于抗原特异性细胞免疫反应的新型免疫检测技术，已被证明在结核诊断、检测潜伏感染、监测治疗效果等方面有潜在的应用价值[3-5]。……