丙泊酚对大鼠缺氧后海马细胞谷氨酸转运蛋白表达及其功能的影响
2013-06-21郑玉珍
山东医药 2013年29期
郑玉珍,闫 诺,张 彦,梁 禹
(1天津市环湖医院,天津300060;2天津武警医学院附属医院)
谷氨酸是中枢神经系统主要的兴奋性氨基酸递质,经突触前膜释放至突触间隙,然后作用突触后膜受体发挥生理效应。生理状态下,突触周围胶质细胞谷氨酸转运蛋白可摄取突触间隙过多的谷氨酸以补充谷氨酸循环。有研究显示在创伤、脑卒中等病理状态下,胶质细胞转运蛋白转录及表达降低[1],摄取功能障碍,造成大量谷氨酸在突触间隙聚集,频繁诱发突出后兴奋性电位,引起神经细胞兴奋性神经损伤。丙泊酚是一种静脉麻醉药,可通过多种机制发挥脑保护作用。但是,丙泊酚是否通过调节谷氨酸转运蛋白(EAAT)的表达和降低缺氧后兴奋性神经毒性损伤发挥脑保护作用,尚无文献报道。2011年8月~2013年2月,我们就丙泊酚对缺氧后EAAT表达和谷氨酸摄取的影响进行研究,以进一步探讨缺氧后丙泊酚的脑保护作用机制。
1 材料与方法
1.1 细胞培养及分组 参照Velly等[2]方法,无菌条件下取10个月龄SD大鼠的海马组织,去除脑膜和血管,用0.25%胰蛋白酶消化成细胞悬液后,接种到预先用多聚赖氨酸0.1 g/L处理24 h的培养瓶内,24 h后更换培养基,以后3 d更换1次培养基。第7天时,放入恒温摇床内,100 r/min振摇5 h;弃去培养基,用0.5%的胰蛋白酶消化吹匀后,接种于培养板中,待长成连续单层后,按试验需要分为对照组和丙泊酚组,每组6个复孔,继续培养7 d进行缺糖/缺氧模型制作。对照组:用无糖Earles培养液,置于37℃、5%CO2氮气缺氧罐中缺糖/缺氧培养6 h。……
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