张西波，段启龙，李忠廉，刘军舰，尚海涛，郝成飞，张鸿涛，鲍建亨

(1天津市南开医院，天津300100;2山东医学高等专科学校)

阻塞性黄疸可以通过多种机制造成肝细胞损伤，研究其肝损害机制，对如何保护及改善肝功能具有重要意义。诱导型一氧化氮合酶(iNOS)主要分布在肝细胞、巨噬细胞、Kupffer细胞中，在各种刺激因子作用下iNOS表达合成NO，发挥生物学作用，参与机体许多病理生理过程［1～4］。2012年3月 ～2012年12月，本实验通过对胆道梗阻大鼠肝脏的iNOS表达的检测，探讨阻塞性黄疸肝损伤的机制。

1 资料与方法

1．1 实验动物分组 选择成年雄性SD大鼠60只，体质量250～300 g，由天津市中西医结合急腹症研究所动物研究中心提供。随机分为假手术对照组(S组)30只和阻塞性黄疸组(OJ组)30只。

1．2 动物模型制备 术前24 h禁食水，麻醉后消毒手术区，上腹正中切口入腹。OJ组开腹后于胆总管中上1/3行胆总管双重结扎;S组开腹后只暴露肝门，游离上段胆总管后关腹。

1．3 标本采集、观察及检测 两组在术后第1、3、7、10、14天每时相点处死大鼠6只，经腹主动脉抽血约4 mL，离心后冷藏。之后迅速切取肝组织，一部分置于-80℃中保存，另一部分用多聚甲醛固定保存。观察动物一般情况，包括动物精神状态、毛色、饮食状况及手术开腹所见，光镜观察肝组织的病理改变。采用苏—赖氏法测定ALT、AST的水平;苯甲酸钠—咖啡因比色法测定血清总胆红素(TB)的水平;RT-PCR检测肝组织iNOS mRNA的表达;免疫组化检测肝组织iNOS蛋白的表达

1．4 统计学方法 采用SPSS17．0统计学软件，计量资料以¯x±s表示，组间比较采用t检验。……