王 刚 王海燕 张 华 贺菊香 吉利宾 杨歆睿 (青海大学医学院病理学教研室，西宁 810001)

雪灵芝(Arenaria kansuensis)为青藏高原特有的石竹科蚤缀属草本植物，分布于海拔4 000米以上的高山草甸和砾石带。雪灵芝的藏药名为“阿仲嘎保”，意为“采天地灵气之人间仙草”，以全草入药。据藏医典籍记载雪灵芝具有“治疗胃肠之溃疡、膨胀、癌症、瘰疬并能健胃助消”［1］。近年来国内研究表明，雪灵芝具有抗炎、抗氧化、促消化以及对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌具有预防作用［2-5］。本研究组的前期研究显示，在一定的浓度范围内，雪灵芝水提物对体外培养的胃癌细胞系，具有增殖抑制作用。本文通过观察雪灵芝水提物对体外培养小鼠脾淋巴细胞增殖水平以及小鼠脾淋巴细胞和人PBMC中Th1型细胞因子表达的影响，探索雪灵芝是否对发挥抗肿瘤作用的免疫细胞及细胞因子具有激活作用。

1 材料与方法

1．1 材料

1．1．1 动物与细胞 清洁级昆明小鼠，4～6周龄，体重(20±2)克，购自青海省地病所实验动物中心;健康人外周血采自研究组工作人员。

1．1．2 主要试剂与仪器 雪灵芝水提物冻干粉剂由本实验室制备，冻干粉剂用PBS溶解(浓度4 mg/ml);四氮唑盐(MTT)、胰蛋白酶、RPMI1640培养基均购自Gibco公司;胎牛血清购自Hyclone公司;刀豆蛋白(ConA)、植物血凝素(PHA)及二甲基亚砜(DMSO)购自Sigma公司;红细胞裂解液购自碧云天生物技术研究所;小鼠IL-2与IFN-γ的ELISA试剂盒购自eBioscience公司;Trizol购自Invitrogen公司;AMV逆转录酶、Taq DNA聚合酶购自Promega公司;SYBR Green实时定量PCR试剂盒购自QIAGEN公司;荧光定量PCR仪(FQD-48A型，杭州博日科技有限公司);酶标仪(Rayto RT-6000型，深圳雷杜生命科学股份有限公司)。……