林亚平 封迎帅 史冬梅 侯艳玲 易受乡 彭 艳

(湖南中医药大学针灸推拿学院 经穴脏腑相关重点研究室 针灸生物信息分析重点实验室，长沙 410007)

课题组前期研究发现，艾灸穴位可通过调节应激性胃黏膜损伤大鼠血清中炎性细胞因子的含量，减轻胃黏膜损伤［1］，但是艾灸对Hp引起的胃黏膜炎性损伤是否有干预作用还不明确?本研究采用Hp灌胃建立大鼠Hp胃炎模型，从胃黏膜组织局部炎性细胞因子 TNF-α、IL-1β、IL-12、IL-10 入手探讨艾灸对Hp大鼠胃黏膜炎性损伤的干预作用。

1 材料与方法

1．1 动物与主要材料、试剂 健康Sprague-Dawley大鼠，SPF级，雌雄各半，体重180～220 g，共50只，由湖南中医药大学实验动物中心提供(合格证号SCXK(湘)2009-2004)。艾炷为苏州东方艾绒厂生产的“神灸 300灸”艾炷(型号:东方一型)，直径0．5～0．5 cm，高 0．8 ～0．8 cm。Hp菌株由南华大学微生物实验室提供Hp国际标准菌株SS1(sydney strain 1)菌种，湖南中医药大学微生物实验室培养 Hp 菌株。大鼠 TNF-α、IL-1β、IL-12、IL-10酶免测定试剂盒购自RD公司。

1．2 动物分组 50只大鼠完全随机分为5组:A．空白组，B．Hp胃炎模型(模型组)，C．模型+艾灸穴位组(艾灸组)，D．模型+艾灸非穴点组(艾灸对照点组)，E．模型+电针穴位组(电针组)，每组10只。

1．3 动物造模及评价方法 Hp胃炎造模:大鼠禁食12小时，先以NaHCO3+消炎痛溶液0．5 ml/只灌胃(有益于Hp的定值)，禁食6小时后再以Hp(含量 109ml－1)1．5 ml/只灌胃，隔天一次，连续 5 次，灌胃完毕后，禁食禁水4小时，之后正常喂养。

造模成功指标［2］:于最后一次灌胃(艾灸)结束后的第4周(28天)即实验的第48天，大鼠禁食12小时后以10%乌拉坦麻醉固定取材，进行造模成功指标检测。尿素酶试验呈阳性(表1)，胃黏膜涂片革兰氏染色检查检测出Hp(图1)，胃黏膜组织HE染色镜检显示有炎性损伤即胃粘膜上皮细胞脱落并有炎性细胞侵润(图2)，说明造模成功。……