粟连秀 张兆明

（广西医科大学第八附属医院 广西贵港 537100）

结直肠癌是人类常见的消化道恶性肿瘤，其发病率及死亡率在逐年上升。CD10是一种细胞表面锌依赖性金属蛋白酶，它在多种正常细胞、肿瘤细胞及一些肿瘤组织的间质细胞中表达，调控着肿瘤的浸润转移［1、2］。本研究采用免疫组织化学的方法检测CD10蛋白在结直肠癌中的表达，探讨其表达与结直肠癌的发生及其与各临床病理因素间的关系。

1 材料和方法

1.1 一般资料 收集我院病理科2010年1月至2012年12月手术切除的结直肠癌标本80例，男56例，女24例。患者年龄28～81岁，平均年龄56.4岁。其中结肠癌48例，直肠癌32例；按Dukes分期：A期14例，B期18例，C期28例，D期20例；按肿瘤的分化程度：高中分化腺癌62例，低分化腺癌18例；有脉管侵犯者24例，无脉管侵犯者56例；肿瘤浸透浆膜者66例，未浸透浆膜者14例；有淋巴结转移者48例，无淋巴结转移者32例。以同期结肠癌根治术标本中远离癌的正常结肠黏膜50例作为对照组。所有标本均经病理证实，术前均未行放、化疗。

1.2 主要试剂 鼠抗人CD10单克隆抗体、即用型快捷免疫组化MaxVisionTM试剂盒及DAB显色剂均为福州迈新生物技术公司产品。

1.3 方法 采用快捷免疫组化MaxVisionTM法。严格按照产品的操作说明。具体染色步骤：①石蜡切片脱蜡和水化后，用PBS（PH7.4）冲洗3次，每次3min。②高温高压抗原修复。③3%H2O2室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3次，每次3min，除去PBS液。④分别滴加CD10一抗工作液，室温下孵育60min。⑤PBS冲洗3次，每次5min，除去PBS液，每张切片加1滴即用型 MaxVisionTM试剂，室温下孵育15min。PBS冲洗3次，每次3min。……