丹红注射液对自然衰老大鼠心脏、大脑组织SOD、MDA及GSH-Px的影响
2012-12-29刘灵芝
刘灵芝
郑州人民医院心血管内科 郑州 450003
衰老是一个受多因素影响的复杂自然生理过程,有关衰老机制的众多研究中,自由基学说和细胞凋亡学说越来越受到重视[1]。丹红注射液作为一种活血化瘀药物,其是否也具有抗氧化作用尚未见报道。作者采用生化法检测了应用丹红注射液后自然衰老大鼠心脏、大脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,探讨其对自然衰老大鼠的抗氧化作用。
1 材料与方法
1.1 主要试剂及仪器 丹红注射液(批号:国药准字Z20026866)购自菏泽步长制药有限公司,维生素E(Vit E)注射剂(批号:110412)购自上海通用药业股份有限公司,SOD、MDA、GSH-Px、考 马 斯 亮 兰 蛋 白 测 试 盒 (批 号 均 为:20110709)均购自南京建成生物工程研究所。722型分光光度计为上海第三分析仪器厂产品,BP121S电子天平为德国Sartorius公司产品。
1.2 实验对象 健康18月龄雄性Wistar大鼠,体质量387~412g,购自河南省实验动物中心。
1.3 实验分组及给药方法 入组40只Wistar大鼠随机均分为衰老组、Vit E组(Vit E 50mg/kg)、丹红注射液大剂量组(丹红注射液1.0mL/kg)和丹红注射液小剂量组(丹红注射液0.5mL/kg)4组,每组10只。自然衰老组大鼠皮下注射0.85%生理盐水2mL/kg,3个处理组注射相应浓度药物2mL/kg,1次/d,连续12个月。
1.4 SOD、MDA和GSH-Px检测 各组大鼠末次给药1h后,腹腔注射1%戊巴比妥钠麻醉,取出心脏、大脑组织,4℃生理盐水冲洗,滤纸吸干,将大脑及心脏左心室组织制成匀浆,3 000r/min离心15min,取适量上清液,按试剂盒说明测定SOD、MDA和GSH-Px。总蛋白量测定采用考马斯亮兰法。
1.5 统计学处理 采用SPSS 13.0进行统计分析,定量数据用BZ_15_1694_320_1782_360表示,比较采用单因素方差分析及LSD法,检验水准α=0.05。
2 结果
与衰老组相比,3个处理组大鼠心脏、大脑组织SOD、GSH-Px水平升高、MDA水平降低(P<0.05);丹红注射液大剂量组、Vit E组与丹红注射液小剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1、2。
表1 丹红注射液对自然衰老大鼠心脏SOD、MDA及GSH-Px水平的影响
表2 丹红注射液对自然衰老大鼠大脑SOD、MDA及GSH-Px水平的影响
3 讨论
随着年龄的增长,自由基产生增多,清除能力却下降,进而导致体内自由基过剩,从而促进机体的衰老,这就是经典衰老的自由基理论[1]。有研究[2-5]表明,衰老的自由基理论是研究最彻底、得到认可最多的衰老形成机制,其认为机体内的自由基产生和清除在正常情况下处于一种动态平衡状态,既发挥了自由基的生物学作用,又避免了自由基过剩对机体造成的损害,然而当机体随着年龄的增长,自由基的产生或清除过程出现反常行为时,就导致了体内过剩的自由基,从而造成机体各种器官的衰老和功能丧失或消弱,例如当机体的自由基清除剂SOD及GSH-Px水平下降时,体内就会蓄积大量的自由基,这些过量的自由基可以造成机体生物膜的损伤,促进脂质过氧化的进展,使体内 MDA水平升高,而MDA的升高既是机体氧自由基损伤的标志,同时其本身也能对生物膜造成损伤。
本文结果显示:3个处理组较衰老组大鼠心脏、大脑组织SOD、GSH-Px水平升高、MDA水平降低,提示丹红注射液对衰老大鼠具有抗氧化作用,能降低脂质过氧化程度,同时也进一步验证了Vit E的抗氧化作用;丹红注射液大剂量组和Vit E组的SOD、GSH-Px、MDA相似,而丹红注射液小剂量组的SOD、GSH-Px低于前2组,MDA高于前2组,提示丹红注射液的抗氧化作用具有一定的剂量依赖性,且一定量的丹红注射液具有与Vit E相似的作用。总之,通过本研究我们可以发现,丹红注射液对衰老大鼠具有抗氧化作用,这说明其可能通过抗氧化来发挥抗衰老作用。
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