变应性鼻炎小鼠模型的建立与IL-4、IFN-γ水平检测
2012-12-29崔鲁佳岩李婵娟秦丽娜
崔鲁佳 阮 岩李婵娟 秦丽娜
(1.广州中医药大学第一附属医院,广东 广州 510000;2.中山大学,广东 广州 510275;3.北京中医药大学第三附属医院,北京 100020)
变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)在耳鼻咽喉科是一种常见病,是由致敏原引起体内变化而引起的鼻黏膜慢性炎症反应性疾病,主要的临床表现有鼻塞、流鼻涕、鼻痒、打喷嚏,以及嗅觉功能障碍等,近年来随着工业化程度的发展,生态环境的恶化,AR的患病率在全球有增长的趋势,据国外统计,其发病率为10%~40%。变应性鼻炎已成为全球性健康问题。目前已用于变应性鼻炎造模的实验动物种类繁多,所选动物有豚鼠、大鼠、小鼠及新西兰兔等。本实验使用卵清蛋白诱发C57小鼠建立变应性鼻炎动物模型,对其症状学、病理生理学进行观察,并对IL-4、IFN-γ水平进行检测,为该病的临床研究提供依据。
材料与方法
1.材料
(1)实验动物:采用清洁级、8周龄雄性C57BL6系统小鼠,体重在16-20g左右,共24只,购于广东省实验动物中心。在空调动物房饲养,自由饮水,恒温恒湿的环境下,SPF级固体饲料,适应性饲养7天后开始正式实验。24只小鼠随机分为2组:实验组、对照组,每组12只。另有2只体重250-300g的SD大鼠(购于广东省实验动物中心),饲养条件相同,避免接触过敏原,被动皮肤过敏反应(passivecutaneous anaphylaxis reaction,PCA)备用。
(2)主要试剂:致敏原为卵清蛋白(OVA),购自上海欧韦达仪器科技有限公司(日本和光纯药工业株式会社生产);佐剂为氢氧化铝(上海化工试剂总厂)。IL-4、IFN-γ 的 ELISA试剂盒均购置美国R&D公司。
2.AR模型的建立:
(1)致敏:实验组小鼠用OVA 10ug、AI(OH)2mg加入生理盐水0.1ml比例制成混悬液,自第0天开始腹腔注射,隔天1次,共7次。……
