刘建红

(天津市第三中心医院，天津 300170)

卵巢癌是妇科三大恶性肿瘤之一，因其解剖位置较深和症状不明显，是转移早且确诊晚的极具恶性度的肿瘤。由于该肿瘤易复发且对化疗药物存在耐药性，使得患者5 年生存率很低，仅为30 %左右。卵巢癌80% ～90%来源于卵巢表面上皮细胞，其病因不明，一般认为与内分泌、环境、遗传等多方面因素有关。近些年来，针对激素和上皮性卵巢癌(epithelial ovarian carcinoma ，EOC)之间关系的研究颇多，一般认为上皮性卵巢癌为激素依赖性肿瘤，激素在上皮性卵巢癌的病因和辅助治疗中发挥重要作用。随着分子生物学和现代免疫学的发展，细胞因子与肿瘤之间的作用机制为了解肿瘤的发生、转移提供了新的思路。本实验探讨促性腺激素、细胞因子和上皮性卵巢癌的关系。

1 材料与方法

1.1材料人卵巢低分化乳头状腺癌细胞株(OVCAR-3)和人上皮性卵巢癌细胞株(Caov -3)均购自美国ATCC。OLYMPUS CK2 倒置式生物显微镜(日本OLYMPUS)、302 -01 型CO2孵箱(美国NATIONAL APPLIANCE COMPANY)、Microplate reader Model 550(美国BIO - RAD COMPANY)。FSH、LH、hrIL-6、抗-IL-6 抗体、四甲基偶氮唑蓝(MTT)(sigma)购自北京舒伯伟公司;二甲基亚砜由苏州第二化工研究所生产。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 各取对数生长期卵巢癌细胞悬液(2 ×105/ml)加入96 孔板中，每孔100 μl，每组6 孔，37 ℃，5%CO2，饱和湿度培育24 h 弃去培养基，更换含有10%活性炭吸附的胎牛血清RPMI 1640 或DMEM培养基培养24 h，以去除原胎牛血清所含激素对细胞生长的影响。加入相应的刺激因素:①加入不同终浓度的FSH 和LH(20、40、60、80 和100 IU/L)和不同终浓度FSH+抗IL-6 中和性抗体(50 μg/ml)的培养基200 μl;②加入不同终浓度hrIL -6(20、40、60、80 和100 μg/ml)和hrIL -6 + 抗IL -6 中和性抗体(50 μg/ml)的培养基200 μl。分别设置6 个平行对照孔，另设6 个不加药的细胞培养基孔作为阴性对照，37 ℃培育96 h 后，在培养终止前4 h 加入MTT 溶液(5 mg/ml)，每孔20 μl，37 ℃继续培育4 h，弃去培养液。……