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大鼠脑部微透析实验中透析效率的研究

2012-12-15卢剑清

生命科学仪器 2012年5期
关键词:效率实验

卢剑清,卢 嵩

(北京理工大学生命学院,北京 100081)

微透析技术是利用可溶性小分子可以自由穿透半透膜,而大分子物质被截留的特点,以一根微小的探针置于需要检测的组织部位,以一定速率向探针内灌注与组织内体液相似的等渗溶液,在探针顶端的半透膜处与体内小分子物质透过浓度梯度进行物质交换,从而使其进入透析液。这样通过收集透析液的方法并进行检测就可以实时反映生物体内小分子物质的情况[1,2]。

本文将微透析探针植入大鼠脑部黑质区,在透析液中加入一定浓度的多巴胺(Dopamine,DA)进行灌注,通过测定透析后透析液中的DA浓度,对研究微透析探针的透析效率进行了研究[3]。

1 材料

1.1 微透析实验

Wistar大鼠(200~300g,北京维通利华实验动物有限公司);MAB6.14.1型微透析探针(瑞典MAB公司);CMA402型微量注射泵、CMA/120 清醒动物活动装置、Univentor 820 微量低温分步收集器(瑞典CMA公司);SN-1N型脑立体定位仪(日本Narshige公司);牙科钻(韩国STRONG公司);戊巴比妥钠(美国Amresco公司);多巴胺(美国Sigma公司)自凝造牙粉(德国贺利氏公司);NaCl、KCl、CaCl2、H2O2(分析纯,北京化工厂);手术刀、止血钳、手术剪刀、手术镊子等(上海医疗器械厂)。

1.2 色谱分析

582型二元泵、542型自动进样器、5600A型库伦阵列检测器、6210型电极(美国ESA公司);甲醇、乙腈(色谱纯,美国Thermo Fisher公司);Discovery®HS F5柱(250 mm × 4.6 mm i.d., 5 μm,美国Supelco公司)、柠檬酸、Na2EDTA(美国Amresco公司)、Na2HPO4(分析纯,北京化工厂)

2 方法

2.1 微透析实验

2.1.1 微透析探针的植入

取250g左右的大鼠,称重后以70mg/kg的剂量腹腔注射戊巴比妥钠,待其昏迷后将其固定在脑立体定位仪上,剃去头部毛发,使用手术刀沿颅骨中锋划开头皮,用止血钳将头皮撑开。……

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