邝兆进，操红缨，黄 萍，吴清和

(广州中医药大学中药学院，广东广州 510006)

大鼠的尿动力操作相对繁杂，尚缺乏统一规范的操作方法，目前乌拉坦麻醉下经尿道插管大鼠膀胱测压的方法主要有两种:一种是两根无菌3F输尿管导管先后导入尿道测压，分别与压力传感器及微量注射泵连接;另外一种是单根3F膀胱测压导管，导管接上三通，三通一端与微量注射泵相接，另一端接尿动力仪的膀胱压力传感器。这两种方法各有优缺点，本文比较此两种测压方法分别测量两组不同年龄大鼠的膀胱充盈期内压，以明确两种测压方法的差异，并为大鼠膀胱测压方法的选择及改进提供参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象 SD♀6月龄大鼠11只，体质量240～280 g。SD♀12月龄大鼠11只，体质量320～400 g;由广州中医药大学实验动物中心提供［SCXK(粤)2008－0020］。

1.2 材料和仪器 测压导管:自制3F膀胱测压导管、带接头连续硬膜外麻醉导管、三通转换接头;尿动力学检查仪为Laborie 94型(加拿大Laborie公司产品);微量注射泵(浙江史密斯医学仪器有限公司WZ-50C6型);乌拉坦为国药集团化学试剂有限公司产品。

1.3 充盈性膀胱测压

1.3.1 方法一(双管法)［1］① 检测前处理:大鼠称重后，25%乌拉坦(0.7 g·kg－1)腹腔注射麻醉，仰卧位固定。将两根无菌3F输尿管导管先后导入尿道，作为膀胱测压管和灌注管。将乳胶手套小指末端一截密封包绕连续硬膜外麻醉导管的末端制成球囊作为腹压测定管导入大鼠直肠4 cm。排空大鼠膀胱，测压管与压力传感器相连;注水管连接微量注射泵，泵水速度为0.5 ml·min－1。② 充盈期膀胱内压及漏尿点压测定［2］:体内置零后开启微量注射泵向膀胱内灌注生理盐水，此过程中注意观察尿道外口有无液体溢出。液体溢出时记录的膀胱压即为膀胱漏尿点压(bladder leak point pressures，BLPP)，同时停止灌注，观察膀胱压力曲线，记录其峰值，即为最大膀胱排尿压(maximum voiding pressure，MVP)。计算灌注时间×灌注速度，即膀胱最大容量(maximum bladder capacity，MBC)。以1 ml注射器抽出膀胱内残余尿，即残余尿量(Post void residual，PVR)［3］。排空膀胱，灌注至膀胱最大容量一半时，用手指缓缓按压大鼠上腹部使腹压逐渐上升以模拟Valsalva动作，观察有无尿液从尿道外口溢出，若有尿液溢出，此时记录的膀胱压即为腹压漏尿点压(abdomen leak point pressure，ALPP)［4］。以上压力均重复2～3次，取其平均值。

1.3.2 方法二(三通法)［5］① 检测前处理:大鼠称重后，以25%乌拉坦(0.7 g·kg－1)腹腔注射麻醉后，仰卧位固定。经尿道插入单根3F膀胱测压导管，导管接上三通，用注射器抽出膀胱内尿液后，三通一端与微量灌注泵相接，另一端接尿动力仪的膀胱压力传感器，将乳胶手套小指末端一截密封包绕连续硬膜外麻醉导管的末端制成球囊作为腹压测定管导入大鼠直肠4 cm。②充盈期膀胱内压及漏尿点压测定同前。

1.4 膀胱测压指标 膀胱漏尿点压(BLPP)，腹压漏尿点压(ALPP)，最大排尿压(MVP)，膀胱容量(MBC)，残余尿量(PVR)，排尿量即有效膀胱容量(voiding volume or effictive cystometric capacity，Vv or ECV=MBC－PVR)，顺 应 性(bldader compliance，BC= △V/△P=MBC/BLPP)，排尿效率(efficiency of voiding，EV=VV/MBC×100%)。

Tab 1Effect of two cystometric methods on rat BLPP and ALPP of different ages(±s，n=11)

Tab 1Effect of two cystometric methods on rat BLPP and ALPP of different ages(±s，n=11)

*P ＜0.05，P ＜0.01，6-month rats vs 12-month rats;▲▲P ＜0.01 Double catheters vs single catheter connected with tee(the same beloa)

Group BLPP/cm H2O Double catheters method Single catheter conn ected with tee ALPP(cmH2O)Double catheters method Single catheter conn ected with tee 6-month rats 25.545 ±5.444 35.723 ±6.862▲▲43.407 ±11.861 45.678 ±10.823 12-month rats 20.983 ±5.229* 37.381 ±11.672▲▲ 41.017 ±8.547 54.360 ±12.701＊▲▲

Tab 2Effect of two cystometric methods on rat MVP and MBC of different ages(±s，n=11)

Tab 2Effect of two cystometric methods on rat MVP and MBC of different ages(±s，n=11)

Group MVP/cm H2O Double catheters method Single catheter conn ected with tee MBC/ml Double catheters method Single catheter conn ected with tee 6-month rats 23.636 ±5.029 31.159 ±6.639▲▲1.341 ±0.666 1.842 ±0.944 12-month rats 19.124 ±5.572* 33.173 ±11.001▲▲ 2.314 ±1.530* 2.910 ±1.539*

Tab 3Effect of two cystometric methods on rat PVR and Vv of different ages(±s，n=11)

Tab 3Effect of two cystometric methods on rat PVR and Vv of different ages(±s，n=11)

Group RV/ml Double catheters method Single catheter conn ected with tee Vv/ml Double catheters method Single catheter conn ected with tee 6-month rats 0.280 ±0.232 0.219 ±0.162 1.048 ±0.458 2.122 ±0.725▲▲12-month rats 2.036 ±1.839＊＊ 1.126 ±1.068＊＊ 1.145 ±0.599 1.489 ±0.560*

Tab 4Effect of two cystometric methods on rat BC and EV of different ages(±s，n=11)

Tab 4Effect of two cystometric methods on rat BC and EV of different ages(±s，n=11)

Group BC(ml/cm H2O)Double catheters method Single catheter conn ected with tee EV/%Double catheters method Single catheter conn ected with tee 6-month rats 0.054 ±0.027 0.048 ±0.023 79.910±19.298 81.700 ±13.680 12-month rats 0.088 ±0.037* 0.075 ±0.040* 58.216 ±28.788* 58.915 ±26.963*

1.5 动物护理 检测完毕后，动物活力碘消毒尿道外口及肛门，使用庆大霉素 0.5 mg·kg－1，ip，qd，共 3 d。方法一测完5 d后，再用方法二重复测定1次。

1.6 统计学分析 所有实验数据均采用SPSS 16.0软件进行统计学分析，计量资料均采用±s表示，两两之间比较采用配对t检验。

2 结果

2.1 两种测定方法对大鼠BLPP、ALPP的影响 如Tab 1所示，用双管法测得12月龄组动物BLPP比6月龄组低(P＜0.05)，ALPP差异无显著性，而三通法测得两组动物的BLPP差异无显著性，12月龄组的ALPP比6月龄组的高。结果显示，三通法测得两组动物的BLPP、ALPP均高于双管法的测定结果。

2.2 两种测定方法对大鼠MVP、MBC的影响 如Tab 2所示，双管法测得12月龄组动物MVP比6月龄组的低、MBC比6月龄组的高，且差异存在显著性(P＜0.05)，而三通法测得的两组动物的MVP无统计学意义，12月龄组的MBC比6月龄组的高。两种方法测定结果显示，三通法测得两组动物的MVP值均明显高于双管法的测定值(P＜0.01)，而MBC值亦有增高的趋势。

2.3 两种测定方法对大鼠PVR、Vv的影响 如 Tab 3所示，双管法测得12月龄组动物PVR比6月龄组的高(P＜0.01)，Vv差异无统计学意义。而三通法测得12月龄组动物PVR比6月龄组的多(P＜0.01)，Vv比6月龄组高。两种方法测定结果看，三通法测得两组动物的Vv比双管法高，PVR比双管法小。结果显示:三通法对大鼠排尿的影响较双管法小。

2.4 两种测定方法对大鼠BC、EV的影响 如Tab 4所示，两种方法测得12月龄组动物BC比6月龄组的大，而EV比6月龄组小(P＜0.05)。两种方法测得的结果差异无统计学意义。

3 讨论

正常排尿过程的是由膀胱、尿道相互协调共同完成的。尿道、膀胱结构功能改变及病变均也可产生下尿路症状(LUTS)。而老龄化是膀胱及尿道的结构功能改变的主要因素。

漏尿点压［6］(LPP)是指尿液从尿道口流出时的膀胱压力，根据驱使尿液流出的膀胱压力的来源不同，分为两类:①膀胱漏尿点压(BLPP);② 腹压漏尿点压(ALPP)。ALPP主要反映尿道括约肌的关闭能力，腹压增加使尿道括约肌关闭能力增强;而BLPP主要反映开放尿道所需的逼尿肌压力，逼尿肌压增加会使尿道开放，这两个指标对梗阻诊断及上尿路功能预测有较大的临床意义。

本实验结果显示，用双管法测出的膀胱压力(BLPP、MVP)12月龄组比6月龄组的低，与文献报道结果［1］相似，说明老龄化动物容易出现尿失禁等情况，其原因可能是由于膀胱及尿道括约肌随着老龄化其功能也开始下降［7］。而用三通法则前面两指标没有差异，且测得的ALPP，12月龄组大鼠比6月龄组大鼠高，这样结果与上述理论相反。且三通法各压力指标测定的结果均比双管法高。其原因可能是微量注射泵的部分压力通过三通阀传导到压力感应器上，使膀胱内压测定结果在实际压力基础上叠加所致，对于这种情况在临床上膀胱穿刺造瘘测压时，通过减除测压前微量泵所致的压力。但实验中微量泵的压力不会固定不变，会随着膀胱灌注压的增大而增大。这也就是本实验方法的缺点，使得测得结果不符合理论的原因。

使用双管法的缺点在于，双管法使用两根导管，在尿道中占用较大的空间，且两管间有缝隙，影响尿道括约肌的关闭能力，使不能完全起到正常控尿的功能，故测出两组动物的ALPP无差异;而三通法使用一根导管，这样可以减少对尿道闭合功能的影响但增加尿道阻力。有学者［1］认为可能因为经尿道置管测压，导管起到了支撑尿道的作用，在一定程度上降低了尿道的密闭性，这也是该方法有悖正常生理状态的欠缺之处。但有学者认为［8］，经尿道置管虽可能因为扩张尿道或激活传入神经而影响膀胱尿道功能，但目前尚无更好的无创性方法能有效的测定局部的尿道反应和功能。

当尿液开始排放时，膀胱逼尿肌无抑制性收缩，尿道括约肌松驰，膀胱压大于尿道压使尿液排出;当膀胱压与尿道压相同或相近时，则停止排尿。尿液的排泄情况与膀胱的舒缩能力有关与，与测压导管的存在影响无关，故两种方法测得两组动物的膀胱容量MBC、排尿后的残余尿量PVR、膀胱的舒缩功能BC及排尿效率EV无影响，这可能与年龄有一定的关联性。有些学者已经对年龄相关性的尿动力进行研究，但由于动物数少等原因，膀胱压力指标有年龄的变化趋势，但差异无统计学意义，这有待进一步研究。

综上所述，两种大鼠膀胱测压方法对尿动力的测定存在明显差异，用双管法测得两组动物的BLPP、MVP、MBC、PVR、BC、EV差别均存在显著性(P＜0.05～0.01)，符合生理学意义;三通法测定结果显示，两组动物比较，MBC、PVR、Vv、BC、EV差别均有显著性(P＜0.05～0.01)，符合生理学意义，而12月龄组ALPP比6月龄组高与膀胱老年化括约肌功能下降不一至;说明两种方法测定的结果存在一定的差异性。以上两种方法各有优劣:双管法测定大鼠的BLPP、MVP比较接近真实情况，但影响尿道的闭合能力，对于年龄化对ALPP的影响还需进一步研究;而三通法对膀胱括约肌的闭合能力及排尿的影响相对较少，但要排除管道阻力及泵压力的叠加对压力测定结果等影响。两种方法对于膀胱储尿排尿能力相关的指标PVR、Vv、BC、EV无明显影响，故两种方法被应用于实验研究有其一定的科学性。因此，制备直径更小的单根双腔或三腔导管用于动物的尿动力学研究，以尽可能减小导管对尿道的扩张和刺激影响将有助于本方法的改进。

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