一例鸡痘的病理学观察
2012-12-03宋国华吴玉梅
赵 玲 ,刘 艳 ,宋国华 ,刘 燕 ,吴玉梅 ,徐 凯
(1.四川省洪雅县畜牧兽医局,四川 洪雅 620340;2.四川省内江市畜牧局,四川 内江 641000)
雅安某养殖规模为3000只左右的鸡场,鸡群感染了某疾病,发病率为50%,死亡率为30%左右。2012年6月12日,此鸡场送检10只5周龄病鸡,其临床表现为冠髯及头部水肿,皮肤上可见大量的坏死结痂。笔者对其心、肝、脾、肺、肾、皮肤作了病理学诊断,同时也对此病例进行了鸡瘟和禽流感的血清学鉴别诊断,具体报告如下:
1 材料与方法
1.1 病料来源 雅安某鸡场送检的10只5周龄病鸡,分别采取该10只病鸡的心、肝、脾、肺、肾、皮肤等组织样本。
1.2 仪器设备及病毒、血清、试剂等 HE染色试剂、石蜡,切片机、烘箱、热水箱、显微摄影系统;鸡瘟病毒、禽流感病毒、酶标SPA、待检病鸡血清,0.01 mol/L PBS封闭液,2mol/L H2SO4,pH 9.6的碳酸盐缓冲液,3%H2O2,柠檬酸盐缓冲液,OPD、酶标板、酶联检测仪、微量加样器等。
1.3 方法
1.3.1 病理学诊断
1.3.1.1 病料固定。用福尔马林(10%)固定12~24h,将组织修成1 cm×1 cm×0.5 cm的切块,继续固定6~12 h。
1.3.1.2 水洗及脱水。水洗(流水冲洗1h左右),依次用75%酒精浸泡6~12 h,85%酒精浸泡6~12 h,95%酒精浸泡12 h,无水乙醇Ⅰ浸泡1~2 h,无水乙醇Ⅱ浸泡1~2 h。放入甲苯液透明,甲苯液Ⅰ1~2 h,甲苯液Ⅱ1~2 h。
1.3.1.3 包埋。将标本放入甲苯石蜡,在温度为60℃的温箱内保持30min,再将标本转入纯石蜡于60℃烘箱中保持1~2h,然后迅速将溶蜡倒入模子内并将材料放入底部。
1.3.1.4 切片。将蜡块底部熔化后迅速粘在木块上(2.5cm×2cm×1.2cm),修整多余的蜡,使蜡块呈梯形,然后在切片机上切片(进入距为5nm)。
1.3.1.5 表片。切下蜡片放入35℃左右的温水中让其自然伸展,再将涂上蛋白胶的载玻片放入水中,同时捞起切片材料,最后放入37℃烘箱内干燥。……
