改良组织芯片技术在胃癌研究中的应用及体会
2012-12-01刘银华张修稳卢林明赵国海
刘银华,张修稳,卢林明,赵国海
(1.皖南医学院附属弋矶山医院 病理科,安徽 芜湖 241001;2.皖南医学院附属弋矶山医院 急诊外科,安徽 芜湖241001;3.皖南医学院 病理学教研室,安徽 芜湖 241002)
组织芯片(tissue chip,TC)是用大量组织标本高密度排列而成的组织微阵列(tissuemicroassays),即微缩组织切片。Kononen等[1]于1998年在Nature Medicine上首次报道了组织芯片这一高通量技术,在一张组织芯片上有序地固定着成百甚至上千个组织样本,每个样本为圆盘状,直径为0.6~2.0 mm。这样的组织芯片可被用来做特定的分子分析如DNA、mRNA的原位分子杂交和蛋白的免疫组织化学染色等。作为一种新型生物芯片,该技术自问世以来,已经在乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌等肿瘤的研究中广泛应用,本研究通过制备大规模胃癌组织芯片,探讨组织芯片制作方法的优化以及其在胃癌组织中的应用价值。
1 资料和方法
1.1 一般资料 调取皖南医学院附属弋矶山医院胃肠外科2007年1月~2010年12月的胃癌手术病例,共1 235例,其中男性874例,女性361例,年龄42~79岁,平均(61.4±8.3)岁。
1.2 组织芯片的设计与制作
1.2.1 空白蜡块制作 选取62~67℃纯蜂蜡(上海华申康复器材厂)放入98℃温箱内融化1 h,弃去底部沉渣后用蜡块制作模具制成长宽高为34 cm×24 cm×2 cm大小蜡块。
1.2.2 受体蜡块制作 首先我们用刻度尺和手术刀片在空白蜡块上画格,横竖间距均为2.5 mm,距边缘约2 mm;再应用组织微阵列制作仪,在已画好的方格内打孔,制作成8×12阵列的受体蜡块,每个微孔的直径为1.2 mm,间距约为1 mm,深约3 mm(见图1);本实验使用的组织微阵列制作仪系由北京博医康医疗仪器有限公司所生产,该仪器配备有定位仪以及直径分别为0.9 mm、1.2 mm、1.6 mm三种规格的打孔采样针。……
