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正交试验法优选女贞子中特女贞苷的提取工艺

2012-11-29陈海华谢小伟齐君君孙志良

中国兽药杂志 2012年10期
关键词:工艺

张 艳,陈 健,陈海华,席 娟,谢小伟,齐君君,伍 勇,孙志良

(湖南农业大学动物医学院,长沙 410128)

女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait.的干燥成熟果实,具有补肝肾、强筋骨之功效,是多种中兽药制剂的主要组分,用于提高猪与肉鸡的抵抗力、生产性能、以及蛋鸡的产蛋率与品质[1-4]。女贞子含有多糖、三萜类、环烯醚萜类和对羟基苯乙醇苷类等多类化学成分,其中,特女贞苷是女贞子的主要有效成分之一[5]。在现行的2010年版《中国兽药典》中,以特女贞苷作为质量控制指标成分,但目前少有文献报道女贞子中特女贞苷的提取工艺研究,本文采用正交试验方法,以特女贞苷的含量作为考察指标,优选特女贞苷的提取工艺,以期为提高兽药质量标准和新兽药开发提供研究基础。

1 材料

1.1 仪器 岛津2010AHT高效液相色谱仪(SIL-20A自动进样器、SPD-20A紫外-可见检测器、LCSolution工作站)(岛津企业管理(中国)有限公司);Sartorius TE 212-L电子天平,感量0.0001 g(北京赛多利斯公司);KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试药 特女贞苷(南京泽朗医药科技有限公司,批号20120213,纯度>98%);女贞子药材购于湖南中医药大学附属一院中药房,并按照2010版《中国兽药典》进行鉴定,符合标准;水为超纯水,乙腈为色谱纯,其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 特女贞苷含量测定

2.1.1 色谱条件 色谱柱:Agilent TC-C18(5 μm,4.6 mm × 150 mm);流动相:甲醇 - 水(40 ∶60);流速 1.0 mL/min;检测波长 224 nm;柱温35 ℃;进样量 10 μL。

2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取特女贞苷适量于容量瓶中,加甲醇定容得浓度为1.0 mg/mL对照品贮备溶液。分别精密量取贮备溶液0.4、0.6、1.0、1.6、2.0 mL 置 10 mL 量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,得 0.04、0.06、0.10、0.16、0.20 mg/mL 特女贞苷对照品溶液。……

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