芪参益气滴丸对糖尿病大鼠视网膜AGEs及RAGE mRNA表达的影响
2012-11-26维金明邓辉潘琳刘海丹
苑 维金 明邓 辉潘 琳刘海丹
2北京太阳宫社区卫生服务站
糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)基本病理改变包括:周细胞选择性的丢失;基底膜增厚;微血管瘤的形成;内皮细胞增生;新生血管形成。其中周细胞选择性的丢失和基底膜的增厚是最早的病理改变。晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)在内皮细胞、周细胞及基底膜沉积,通过与其受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)结合起作用,在糖尿病视网膜病变发生过程中起重要作用。本研究以链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠为模型,观察应用芪参益气滴丸对视网膜AGEs和RAGE mRNA表达的影响。
1 材料和方法
1.1 动物
SPF级雄性6周龄SD大鼠82只,体重180~220 g。购自维通利华实验动物研究所。许可证号SCXK(京)2006-0009。
1.2 药物和试剂
链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(美国 sigma 公司出品S0130),购自北京拜尔迪生物技术有限公司。芪参益气滴丸浸膏(国药准字Z20030139),由天津天士力制药股份有限公司提供。阳性对照药物:羟苯磺酸钙胶囊(多贝斯胶囊,国药准字X20000713)。反转录试剂盒PrimeScriptTMRT reagent Kit Perfect Real Time(DRR037A),PCR 扩增试剂盒(DR001A),购自TaKaRa宝生物工程(大连)有限公司。Gene-RulerTMLow Rangge DNA Ladder;AGEs 随机引物;一步法抗兔/鼠通用型抗体Ⅱ(AGEs)购自上海生工生物工程技术服务有限公司。
1.3 动物模型的建立
大鼠适应性饲养1周后,随机分为正常组12只,造模组70只。造模前大鼠禁食12 h,左下腹腔内注射链脲佐菌素,临用前用pH=4.4柠檬酸缓冲液(4℃保存)冰浴配制成浓度为1%的溶液(质量浓度为0.01g/ml),按65mg/kg大鼠体重的剂量使用。正常对照组注射同等体积的生理盐水。72 h后取尾静脉血,用快速血糖仪(罗康全活力型血糖仪)测量血糖。凡空腹血糖≥16.7 mmol/L者即为糖尿病模型大鼠。……
