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蜕皮素对大鼠肺血管通透性影响的实验研究

2012-11-22池达智林昭伟黄东平南方医科大学珠江医院急诊科地址102820

陕西中医 2012年4期

陈 江 池达智 林昭伟 黄东平 南方医科大学珠江医院急诊科(地址102820)

蜕皮甾酮(Ecdysterone,EDS)即β蜕皮激素,是具最强生理活性的蜕皮激素,研究表明EDS能促进创伤愈合、调节免疫3。本实验旨在从肺水肿及肺血管通透性的角度探索EDS是否能减轻肺损伤。

1 材料和方法 1.1 材料和试剂 LPS购自sigma公司,蜕皮甾酮由中国科学院昆明植物研究所提供,其余试剂均为南方医科大学试剂中心提供。

1.2 大鼠急性肺损伤模型及分组 雄性 Wstar大鼠64只,体重200±20g,购自南方医科大学实验动物中心,随机分为正常对照组、损伤组、地塞米松干预组和EDS干预组,每组8只。①正常对照组(N组):大鼠尾静脉注射生理盐水。②损伤组(C组):大鼠尾静脉注射LPS(5mg/kg)。③地塞米松干预组:注射LPS的同时注射地塞米松(5mg/kg)④EDS干预组:注射LPS的同时注射EDS(15mg/kg);另外每组各取8只大鼠于注射LPS(对照组于注射生理盐水)前1min尾静脉注射伊文思蓝50mg/kg。

1.3 肺系数、肺水含量及肺通透指数测定 注射后6h腹主动脉抽动脉血后处死动物,取全肺,计算肺系数(Lungindex)[全肺重(g)/体重(g)]。取左肺上叶测定肺水含量(Lungwater)[肺湿重-肺干重]×100/肺湿重]。取右肺下叶行支气管肺泡灌洗,用Lowry法测定支气管灌洗液(bronchoalveolar,BALF)和血浆的蛋白含量,计算肺通透指数(Lung permeability index,LPI)[BLAF蛋白含量/血浆蛋白含量]。

1.4 肺血管通透性变化 根据Standiford11方法改进,先描绘evans蓝的甲酰胺溶液的标准曲线,各组注射Evans蓝(50mg/kg)动物在注射染料6h后开胸取肺组织300mg,浸泡在4mL甲酰胺分析纯液中,置45~500C温箱中温育72h,待组织中色素与浸泡液中色素达到平衡,取出组织,离心,取上清液,用752型分光光度计λ620nm进行比色,根据标准曲线计算每克肺组织中Evans蓝含量,以反映肺血管通透性变化。……

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