非洲猪瘟与猪瘟双重PCR方法的建立与初步应用

张倩 刘明团 （山东省青岛市畜牧兽医研究所 266100）

根据GenBank中公布的非洲猪瘟病毒Vp72蛋白基因序列(GenBank登录号AY261364)合成阳性质粒P-ASFVP72，采用OIE推荐的PCR引物，扩增片段大小为278bp。另根据GeneBank上公布的猪瘟疫苗株(GenBank登录号AF531433)的全基因组序列，利用生物学软件设计一对引物，构建阳性质粒P-CSFV，扩增片段为424bp。以两种阳性质粒为模板，通过对反应条件的优化，建立了一种可同时检测这两种病毒的双重PCR方法。试验结果证明，该方法可在同一个体系中同时对两个目的基因进行扩增，并且特异性强、敏感性高，具有省时，省力，快速，高效等特点，为ASFV和CSFV的临床诊断和流行病学调查等研究提供了有效的技术支持。

非洲猪瘟病毒； 猪瘟病毒 双重PCR

猪瘟(Classical swine fever，CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起的猪的一种高度接触性传染病，其在世界范围内流行并引起巨大的经济损失。CSF在我国流行多年，是养猪业的头号杀手[1]。20世纪50年代，我国学者研制成功猪瘟兔化弱毒疫苗并大范围应用以后，成功控制了CSF在我国的流行。但随着时间的推移，在疫苗免疫的压力下，CSFV基因变异趋向逐渐远离疫苗株[2]。因此，对CSFV的监测也显得格外重要。

非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)引起的家猪和野猪的一种急性、高度接触性传染病，又称东非猪瘟或疣猪病。临床以高热、食欲废绝、皮肤和内脏器官出血为主要特征，一般发病后2~10d死亡，严重时死亡率可达100%。该病属于世界动物卫生组织(OIE)要求必须报告的A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病[3, 4]。……