喻林,魏敏,陈义坤,罗诚浩,宋旭艳,王洁,陈勇

(1.湖北大学中药生物技术省重点实验室,湖北 武汉 430062；2.湖北中烟工业有限责任公司技术中心,湖北 武汉 430040)

香兰素(Vanillin)又名香草醛,化学名为3-甲氧基-4-羟基苯甲醛.是一种以奶油香草为特征的风味物质,广泛用于冰淇淋、巧克力、乳制甜点、奶油糖果、焙烤食品、豆奶、可乐饮料和烟酒等食品制造中[1].香兰素年用量很大,多数为化学合成[2],其中以愈创木酚和木质素为原料合成的香兰素为主[3].天然香兰素主要是从香荚兰豆荚中提取,由于香荚兰植物的种植受地域和气候环境的限制,产量极少,远远不能满足市场的需求[4].但是大多数化学合成的香兰素在纯度、香气、安全性等方面都亚于天然提取的香兰素,并且化学工艺产生的废弃物对环境存在很大危害.近年来,美国和欧洲的法律认可采用生物活细胞或其中的组成部分所生产的物质为天然产物[5].因此,利用微生物转化法生产天然香兰素成为目前的研究热点[6].本实验室从香荚兰茎中筛选得到的一株桑肠杆菌VL4-3,并首次发现其能转化阿魏酸生产香兰素,对其发酵转化阿魏酸生产香兰素的发酵工艺进行了研究.

1 材料与方法

1.1菌种与培养基桑肠杆菌VL4-3：从香荚兰植物的茎中筛选得到,并经过生理生化分析、16SrDNA扩增和序列分析鉴定为桑肠杆菌(Enterobactermori).斜面培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)：马铃薯浸液200 mL/L,葡萄糖20 g/L,琼脂13 g/L.原始种子培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)：牛肉膏5 g/L,蛋……