周晓景 王芳 牛吉峰

宫颈上皮内瘤变累腺组织中MMP-7的表达及意义

周晓景①王芳①牛吉峰①

目的：检测基质降解素(MMP-7)在宫颈上皮内瘤变(CIN)累腺组织中的表达，探讨其对CIN发生、发展以及对CIN预后的影响。方法：采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化分别检测30例CIN累腺组织、40例CIN非累腺组织、15例正常宫颈组织中MMP-7 mRNA和蛋白表达。结果：累腺CIN组MMP-7 mRNA和蛋白的表达均显著高于未累腺CIN组和正常组(P<0.05)；MMP-7 mRNA及蛋白无论在CIN累腺组还是非累腺组Ⅲ期中的表达显著高于Ⅱ期中的表达，比较差异有统计学意义(P<0.05)，在CINⅡ期和正常宫颈组织中的表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：累腺CIN中MMP-7高表达可能与宫颈锥切术后复发及发展为浸润性宫颈癌倾向密切相关；MMP-7可作为预测CIN预后的指标。

宫颈上皮内瘤变累腺； MMP-7； 预后

宫颈上皮内瘤变(CIN)是与宫颈癌密切相关的一组癌前病变，对于CINⅡ~Ⅲ期，目前主要治疗方法是宫颈锥切术，而CIN累腺与宫颈锥切术后复发及预后相关[1]。MMP-7在许多上皮性肿瘤中高表达，并且与生存率密切相关。本研究通过检测MMP-7在CIN累腺组织中核酸和蛋白表达情况，探讨MMP-7对CIN累腺预后的影响和意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集CIN组织标本70例，均为Ⅱ~Ⅲ期。CIN累腺组30例，Ⅱ期12例，Ⅲ期18例，年龄26~56岁，平均年龄(36.52±3.81)岁。CIN非累腺组40例，Ⅱ期24例，Ⅲ期16例，年龄25~58岁，平均年龄(37.16±4.20)岁。取标本前未经冷冻、激光及药物治疗，标本在阴道镜下活检取材、病理学确诊。取15例正常宫颈组织作对照，对照组年龄30~52岁，平均年龄(36.90±3.45)岁。新鲜组织离体后迅速放入RNAguard中，-80 ℃保存备用。

1.2 RT-PCR法 总RNA提取及逆转录成cDNA、扩增，操作按试剂盒说明书进行。以GAPDH为内参照。MMP-7引 物 序 列：上 游 5’GTGGTCACCTACAGGATCGT3’， 下游 5’ACCATCCGTCCAGCGTTCAT3’(282 bp)；GAPDH引物序列：上游5’TGGGTGTGAACCACGAGAA3’，下游5’GGAATGGACTGTGGTCATGA3’(143 bp)。MMP-7 和GAPDH的PCR反应条件：94 ℃热变性5 min，以94 ℃变性30 s，59 ℃复性30 s，72 ℃延伸1 min顺序共循环38次，72 ℃延伸5 min。反应产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳(90 V，30 min)，EB染色。用Bandscan 5.0生物电泳分析软件进行分析。所测指标均与GAPDH灰度值比值作为基因水平相对值进行比较。……