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鸡传染性贫血病毒VP1基因的原核表达

2012-11-10长江大学生命科学学院湖北荆州434025

长江大学学报(自科版) 2012年8期

冯 昕,荣 俊 (长江大学生命科学学院,湖北 荆州 434025)

匡红艳 (长江大学临床医学院,湖北 荆州 434000)

鸡传染性贫血病毒VP1基因的原核表达

冯 昕,荣 俊 (长江大学生命科学学院,湖北 荆州 434025)

匡红艳 (长江大学临床医学院,湖北 荆州 434000)

根据GenBank上公布的鸡传染性贫血病毒VP1的基因序列设计一系列引物,通过基因扩增得到了鸡传染性贫血病毒(CAV)VP1基因的全长片段和一系列不同N末端截断的VP1基因片段,分别将这些片段插入表达质粒载体pET28a的多克隆位点上,构建成4种重组表达工程菌(E.coliBL21/pET-28-CAVVP1、E.coliBL21/pET-28-CAVVP1Nd29、E.coliBL21/pET-28-CAV VP1Nd56、E.coliBL21/pET-28-CAV VP1Nd137),研究了4种不同长度VP1片段在重组大肠杆菌中的表达, 并通过SDS-PAGE电泳筛选最佳表达方式。结果表明:E.coliBL21/pET-28-CAVVP1Nd29能表达分子质量为44ku的可溶性蛋白,E.coliBL21/pET-28-CAV VP1Nd56能表达分子质量为40ku的不可溶性蛋白,而在E.coliBL21/pET-28-CAV VP1 和E.coliBL21/pET-28-CAV VP1Nd137的诱导表达产物中未见明显的表达蛋白出现。其中可溶性的CAV VP1Nd29蛋白将有可能用于研制CAV诊断抗原和亚单位疫苗研究。

鸡传染性贫血;抗原蛋白;原核表达

鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)是鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)的主要病原,主要侵害雏鸡,造成以鸡群死亡率升高、再生障碍性贫血、骨髓黄化、胸腺等淋巴器官萎缩为特征的免疫抑制性传染病[1-2]。CAV 在鸡群中广泛存在,可水平传播和垂直传播。成鸡感染 CAV 后呈亚临床带毒状态,易被忽视,是养鸡业上潜藏的巨大威胁。自1979年在日本首次分离到CAV[3]以来,包括我国在内的许多国家[4-5]都相继证明了该病毒的存在。目前,CAV在世界范围内已呈蔓延趋势,成为危害家禽业的主要病原体之一,已引起世界各国禽业的广泛关注。……

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