局部应用菟丝子总多糖对家兔骨折修复中TGF-β1表达的实验研究*
2012-11-07李绪松郑臣校付光明广东省中山市中医院中山528400
★ 李绪松 郑臣校 付光明 (广东省中山市中医院 中山528400)
中医骨伤科对骨折的治疗遵从于复位、固定、功能锻炼和三期辩证用药的一般原则。强调“肾藏精,主骨生髓”理论指导下的骨折用药方法。结合临床用药经验,以及现代药理对中药多糖类的研究进展,我们对菟丝子总多糖进行了创新性使用,观察菟丝子总多糖局部应用对家兔骨折的修复TGF-β1表达情况。以说明补肾中药促进骨折修复的可行性和部分内涵。
1 实验材料
1.1 实验动物及分组
选用健康成年家兔63只,体重(2.3±0.3)kg,按性别随机分为三组:菟丝子总多糖组(A组)、BMP/明胶复合物组(B组)以及空白对照组(C组)。每组21只兔。
1.2 主要实验试剂与器材
菟丝子总多糖(广州中医药大学药学院中药制剂室提供);人骨形态发生蛋白(human bone morphogenetic protein,rhBMP)(天津中津生物发展有限公司提供);明胶(成都科龙化工试剂厂生产);TGF-β1免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司生产);DAB(二氨基联苯胺)显色液(武汉博士德生物工程有限公司生产);戊巴比妥钠(上海化学试剂采购供应站分装厂进口分装);Leitz wetzlar 1512型石蜡切片机(德国生产);CK-2型普通光学显微镜(日本Olympus公司生产)。
2 实验方法
2.1 实验动物的造模
以3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)耳缘静脉麻醉成功。家兔取仰卧位,四肢固定于自制兔板上,搬运至手术台上。通过胫腓骨前外侧入路,切口约5~6 cm,逐层切开皮肤、皮下组织及关节囊,显露家兔胫骨。尽量不损伤骨膜。使用线锯将胫骨截断,并形成一约0.5 cm的骨缺损区域。庆大霉素-生理盐水冲洗后,对A、B、C三组分别给予中药菟丝子总多糖、BMP/明胶复合物以及空白处理。……
