李 茜， 沈华浩

(1浙江大学医学院附属第二医院呼吸科，浙江 杭州 310009; 2浙江省人民医院 ICU，浙江 杭州 310014)

1000-4718(2012)03-0512-06

2011-07-24

2012-01-05

浙江省自然科学基金资助项目(No.J20040116)；卫生部科学研究基金-浙江省医药卫生重大科技计划项目(No.WKJ 2005-2-039)

△通讯作者 Tel: 0571-87783729; E-mail:hh_shen@yahoo.com.cn

Foxp3转染对哮喘小鼠脾淋巴细胞功能的影响*

李 茜2， 沈华浩1△

(1浙江大学医学院附属第二医院呼吸科，浙江 杭州 310009;2浙江省人民医院 ICU，浙江 杭州 310014)

目的转染Foxp3至哮喘小鼠脾淋巴细胞，探讨Foxp3表达对脾淋巴细胞功能的影响。方法卵白蛋白(OVA)致敏激发制作哮喘小鼠模型，收集培养脾脏淋巴细胞；使用电穿孔法转染真核表达载体pcDNA3.1(-)-Foxp3至脾脏淋巴细胞，并设转染空质粒组和对照组；RT-PCR和Western blotting检测Foxp3的表达；流式细胞术检测转染后CD4+CD25+Treg细胞/CD4+细胞比例；MTT法检测转染后的脾脏淋巴细胞增殖反应，ELISA检测脾淋巴细胞上清中白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果转染组Foxp3 mRNA 和蛋白的表达水平显著高于空质粒组和对照组；转染Foxp3后CD4+CD25+Treg细胞/CD4+细胞比例显著高于空质粒组和对照组；与空质粒组和对照组相比，转染pcDNA3.1(-)-Foxp3质粒明显抑制了脾淋巴细胞增殖；转染组细胞上清中IL-4和IFN-γ含量低于空质粒组和对照组。结论转染pcDNA3.1(-)-Foxp3至哮喘小鼠脾淋巴细胞，Foxp3得到有效表达。Foxp3的高表达能增加CD4+CD25+T细胞的数量，抑制哮喘小鼠脾淋巴细胞的增殖以及Th1和Th2细胞因子的产生。

T淋巴细胞; 转录因子; 哮喘; 小鼠; 脾

调节性T细胞(T regulatory cell，Treg细胞)被认为参与重要免疫耐受机制，能够抑制获得性免疫反应。CD4+CD25+Treg细胞是最为重要的一种调节性T细胞，其表面持续表达CD25，能够抑制效应性CD4+和CD8+细胞的功能。……