韩 冰， 谢汝佳， 洪 琴， 张成俊， 杨 勤， 程明亮

(贵阳医学院病理生理教研室，贵州 贵阳 550004)

1000-4718(2012)09-1639-05

2012-03-23

2012-07-25

贵州省科技国际合作项目(No.黔科合G字【2011】7013号)

△通讯作者 Tel:0851-6908578;E-mail:hanbing791203@163.com

肝纤维化病理过程中ZEB1和ZEB2的动态表达变化及意义*

韩 冰△， 谢汝佳， 洪 琴， 张成俊， 杨 勤， 程明亮

(贵阳医学院病理生理教研室，贵州 贵阳 550004)

目的观察慢性肝损伤致肝纤维化过程中上皮-间质转化(EMT)调节蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白(ZEB)1和ZEB2的动态表达变化并探讨其调节机制。方法雄性Wistar大鼠40只，随机分为正常对照组、2周、4周、6周和8周模型组，每组各8只，模型组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射60%CCl4，每隔3 d注射1次，处死大鼠后测定肝脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,观察肝组织病理改变；免疫组织化学法检测肝组织中ZEB1、ZEB2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况；real-time RT-PCR方法检测肝脏组织中ZEB1及ZEB2 mRNA的表达变化。结果模型各组大鼠肝脏指数、血清ALT和AST活性显著高于正常对照组(P<0.01)，8周模型组肝纤维化明显；随着肝脏损伤逐渐加重，纤维化程度加深，E-cadherin蛋白的表达显著降低，α-SMA蛋白表达显著升高，ZEB1和ZEB2蛋白和mRNA表达量也逐渐增加，8周模型组肝组织中ZEB1和ZEB2蛋白(46.42±14.36和57.71±13.32)与mRNA(189.00±47.39和277.28±48.55)表达较正常组显著增加(P<0.01)。结论ZEB1和ZEB2蛋白及mRNA表达量随纤维化程度的加重而增加，提示EMT可能通过ZEB1和ZEB2参与肝纤维化的发生发展。

肝纤维化； 慢性肝损伤； 锌指E盒结合同源盒蛋白

锌指E盒结合同源盒蛋白(zinc finger E-box binding homeobox protein，ZEB)是一类具有锌指结构的蛋白，包含2个成员ZEB1和ZEB2，ZEB2又称Smad相互作用蛋白1(Smad-interacting protein 1，SIP1)，由于都具有相同锌指结构而能与含有CACCT的E-box序列和CACCT(G)的E-box相似序列结合，进而调控靶基因的表达。目前已知ZEB1和ZEB2能与上皮细胞内的E钙黏蛋白(E-cadherin)基因的启动子序列中的E-box(CACCTC/G)序列结合而抑制其转录，从而促进上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)的发生[1]。EMT是指原本紧密排列的上皮细胞在某种因素的作用下转化成间质细胞的过程。近年的研究发现，EMT除与肺纤维化和肾间质纤维化发病机制有关外[2-3]，还参与了肝纤维化发生发展。……