查登峰

·实验研究·

TLC法快速检测补肾壮阳类中成药中非法添加酚妥拉明

查登峰

近年来，一些不法分子在补肾壮阳类中成药中非法添加化学药品(如西地那非、他达那非和酚妥拉明等)，夸大疗效，给人民群众的身体健康造成了严重危害。本文研究的内容是采用TLC法［1］对补肾壮阳类中成药中非法添加酚妥拉明的快速初筛。

1 仪器、试剂

1.1 仪器 电热恒温干燥箱DH64

1.2 试剂 甲醇、乙醇、三氯甲烷和二乙胺等均为分析纯

1.3 薄层板 MERCK硅胶G 60铝基片薄层板20 cm×20 cm

2 样品、对照品

2.1 样品 收集了不同的市售补肾壮阳类中成药胶囊剂9批、片剂2批、丸剂7批、糖浆剂1批和合剂1批，共20批。

2.2 对照品 甲磺酸酚妥拉明(原料药)。

3 实验部分

3.1 样品溶液的制备 片剂、丸剂、胶囊剂:取样品(一次最大服用量)，研细，加乙醇10 m l，振摇，超声提取10 min，滤过，即得;合剂、糖浆剂:取样品(一次最大服用量)蒸干至稠膏状，加乙醇10 ml，搅拌，超声提取10 min，滤过，即得。

3.2 阳性样品溶液的制备 取样品(一次最大服用量)和甲磺酸酚妥拉明(一次有效剂量:甲磺酸酚妥拉明40 mg)，混合，照样品溶液的制备法制备。

3.3 提取溶剂的优化选择 文献报道［1］是以甲醇为溶剂，

考虑到甲醇对人身体有一定的伤害，故在甲醇、乙醇、无水乙醇三种溶剂中做了比较实验，结果三种溶剂实验结果基本一致。本着安全、环保及经济的原则，选择了乙醇作为提取及稀释的溶剂。

见图1。T:28℃，R:65%。

3.4 展开剂 选用三氯甲烷-二乙胺-甲醇(15∶3∶2)为展开剂。

3.5 显色 喷显色剂(5%铁氰化钾溶液与9.5%三氯化铁溶液，临用前等量混合)。

3.6 最低检出限 取甲磺酸酚妥拉明40 mg，加乙醇溶解并稀释为:5.0 mg/ml、2.5 mg/m l、0.83 mg/m l、0.6 mg/m l、0.5 mg/ml。点样量:3μl。见图2。T:28℃，R:65%。

图2 1、2:甲磺酸酚妥拉明的浓度为5.0 mg/ml;3、4:甲磺酸酚妥拉明的浓度为2.5 mg/ml;5、6:甲磺酸酚妥拉明的浓度为0.83 mg/ml; 7、8:甲磺酸酚妥拉明的浓度为0.6 mg/ml;9、10:甲磺酸酚妥拉明的浓度为0.5 mg/ml。结果:甲磺酸酚妥拉明的最低检出限为0.5 mg/ml

图1 1甲醇2乙醇3无水乙醇

3.7 20批样品、阳性药品筛查结果 见图3、图4。T:28℃，R:65%。

3.8 讨论

3.8.1 在本文研究中，由于收集的补肾壮阳类中成药中均不含酚妥拉明，因此，我们以中成药的一次最大服用量与甲磺酸酚妥拉明的一次有效剂量作为阳性样品，再分别进行TLC法的研究。

［1］ 美国药典委员会．美国药典．2000．

333000景德镇市第二人民医院

图3

图4 1～20为阳性样品，a～t为样品

结果 a～t样品未见疑似斑点，1～20可见清晰的斑点，故可作疑似非法添加进一步确认。

3.8.2 我们试用自制板进行了薄层色谱研究，详见图五。效果也很理想。为适应快检需要，我们选用了便于携带的高效板。

图5 甲磺酸酚妥拉明自制板

3.8.3 图五是按照美国药典第28版的方法试验，斑点的颜色呈红紫色，原因是美国药典第28版的方法中，薄层板展开、取出、晾干后于100℃干燥1 h再显色而致。为适应快检，本法进行了简化，不在100℃干燥1 h即显色。