王静静，高天勤

(滨州医学院附属医院，山东 滨州256603)

布洛芬是一种疗效确切、不良反应小、安全性高的非甾体解热镇痛药，临床主要用于治疗感冒发热、头痛、牙痛、风湿及类风湿性关节炎以及外科手术后的疼痛等［1］。布洛芬注射液是新近开发的剂型，进一步扩大了其临床范围，方便了患者。笔者参照《中国药典》2010年版进行试验，建立了该品种的细菌内毒素检查法，现报告如下［2］。

1 实验材料

布洛芬注射液，规格 400 mg(4 mL)，批号 111021、111022、11023为山东某公司生产。细菌内毒素工作标准品，批号150601－201070，效价140 EU/支(中国药品生物制品检定所)。鲎试剂(TAL)批号:1102240(湛江博康海洋生物有限公司，规格:0.1 mL/支);批号1103172(湛江安度斯生物有限公司，0.1 mL/支)。灵敏度(λ)均为 0.25 EU·mL－1，且经灵敏度复核均符合规定。细菌内毒素检查用水(BET 水)批号w2010－1，内毒素含量≤0.015 EU·mL－1(中国药品生物物品检定所)。

2 方法与结果［3］

2.1 细菌内毒素限值(L)的确定 布洛芬注射液的临床使用最高剂量为每6 h静脉滴注400～800 mg，滴注时间30 min以上，按我国成人体重60 kg计算，每公斤体重每小时的最大用药量(M)为13.33 mg·(kg·h)－1。根据公式 L=K/M，注射剂 K=5 EU·(kg·h)－1，计算得 L=0.375 EU·mg－1，即本品的内毒素限值为每1 mg中含内毒素的量应小于0.375 EU。

2.2 干扰试验

2.2.1 供试品干扰预试验 按药品说明书要求，市售鲎试剂(TAL)通常为 0.5 ～0.03 EU·mL－1，根据公式 MVD=CL/λ，则布洛芬注射液的最终对应有效稀释倍数为75、150、300、600和1 200。先用BET水将供试品稀释成上述倍数的系列浓度，分别用上述两个厂家的鲎试剂考察上述浓度稀释液的干扰情况，每一浓度做2管，同时做阴性对照和标准对照，结果见表1。由表1可知，供试品在稀释75、150、300、600和1 200倍浓度下对试验均没有干扰作用。

表1 布洛芬注射液干扰预试验结果

2.3.2 供试品干扰试验 为了最终确认是否存在干扰因素的影响，取布洛芬注射液用细菌内毒素检查用水分别稀释，使其最终干扰试验稀释倍数为75倍，按《中国药典》2010年版(二部)附录中的“内毒素检查供试品干扰试验”项进行试验，结果见表2。

干扰试验结果表明，采用安度斯公司和博康海洋公司生产的 TAL，Et和 Es均在0.5～2.0λ 范围内，确认这2个厂家的TAL在供试品稀释75倍无干扰影响。

表2 布洛芬注射液细菌内毒素干扰试验结果

2.5 供试品检查试验 取供试品，按《中国药典》2010年版(二部)附录ⅪE细菌内毒素检查法分别用两个厂家的鲎试剂考察其内毒素限值，结果见表3。由表3可知，三批供试品每1 mL中含内毒素量均小于0.375 EU。

表3 布洛芬注射液细菌内毒素检查试验结果

3 讨论

布洛芬是20世纪60年代上市的现今临床使用最普遍的非甾体抗炎药之一，国内外药典均有收载，布洛芬良好的解热镇痛效果带动了众多剂型的开发上市，但多为口服剂型和局部给药剂型。布洛芬注射剂的研制，是众多疼痛和发热患者的福音。

众所周知，引起热原反应是注射液常见的问题之一。因此，检查注射液中的热原质是确保药品质量的关键环节。目前，常见的检查方法为家兔法和鲎试剂法。布洛芬注射液具有解热镇痛作用，若采用家兔法进行热原质的检查可能会因其药效学作用而出现假阴性结果［3］。鲎试剂因其具有方法简单、成本低等优点而被广泛采用［4］。本试验在参考《中国药典》2010年版的基础上，建立了布洛芬注射液的细菌内毒素检查标准为:取本品，依法检查(《中国药典》2010年版二部附录Ⅺ E)，每1 mg中含内毒素量应小于0.375 EU。

［1］徐隽，宋红萍，刘忠，等.布洛芬注射液的安全性试验［J］，中国医院药学杂志，2011，31(13):1093 －1095.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(二部)［S］.北京:中国医药科技出版社，2010:附录Ⅺ E.

［3］程春雷，高天勤，曹珍艳.注射用盐酸丙帕他莫的细菌内毒素检查［J］.中国医药工业杂志，2011，42(3):219－221.

［4］范治云，国明.眼用平衡盐溶液细菌内毒素检查标准的制订［J］.齐鲁药事，2012，31(8):454 －455.