李自健，杨俊兰，焦顺昌，张 帆，谢文秀，游俊浩

1解放军第161医院 肿瘤内科，湖北武汉 430012；2解放军总医院 肿瘤内科，北京 100853；3海军总医院特需医疗部，北京 100037

恶性肿瘤患者化疗后常导致不同程度的血小板减少，以往临床多采用输血小板，目前临床常在化疗后使用血小板生成素(Thrombopoietin，TPO)来治疗[1-8]，但起效较慢[7]。国外有研究在化疗前使用血小板生成素[9]，但目前临床上对此有些担心，是否会加重化疗药物对巨核细胞的抑制以及是否安全。本实验通过观察化疗药物卡铂对乳腺癌细胞和使用TPO的巨核细胞的抑制率比较，模拟临床上化疗前使用TPO化疗药物对巨核细胞和肿瘤细胞的影响，间接了解化疗前使用TPO是否安全。

材料和方法

1 主要材料 TPO(沈阳三生1ml：15 000U)，卡铂注射液(齐鲁公司10ml：100mg)，天津血研所提供的巨核细胞株MO7e细胞、解放军总医院肿瘤实验室提供的人乳腺癌细胞系MDA-MB-453。

2 细胞培养 把MO7e细胞培养在RPMI-1640培养基中(含10%胎牛血清和浓度20ng/ml的TPO)，在CO2培养箱中培养。人乳腺癌细胞系MDA-MB-453培养在RPMI-1640中(含10%胎牛血清)，在CO2培养箱中培养。

3 TPO不同浓度对MO7e细胞的影响 取MO7e细胞，把细胞浓度调为2×105/ml，把细胞分10组，每组5个复孔，接种在96孔板中，浓度为每孔2×104/100μl，分别加入0、4、8、16、32、64、128、256、512μg/L浓度的TPO，相同方法重复接种3个96孔板，各培养24h、48h、72h，然后每孔加入MTT 20μl，4h后每孔加入100μl二甲基亚砜(DMSO)，使用酶标仪于492nm波长处测定吸光度值(A)，计算MO7e细胞增殖率。公式=(实验组A值-对照组A值)/对照组A值×100%，作出增殖曲线，以上实验全部重复3次。

4 卡铂对加入TPO的MO7e细胞的抑制率 取MO7e细胞，洗涤2次，悬浮于RPMI-1640培养基中(含10%胎牛血清和256ng/ml的TPO)，细胞浓度调为2×105/ml。……