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反相高效液相色谱法同时测定西红花苷I和西红花酸

2012-10-10梁华正袁东香丁武辉刘成佐廖晓峰

梁华正, 袁东香, 丁武辉,2, 刘成佐, 廖晓峰

(1.东华理工大学生物系,江西 抚州 344000;2.临川之信生物科技有限公司,江西 抚州 344000)

西红花苷(crocin)和西红花酸(crocetin)是中药栀子和西红花的重要成份以及药理活性的物质基础。西红花酸是西红花苷的苷元,其结构式如图1所示,西红花酸可以由碱水解西红花苷而制得。西红花苷是西红花酸与不同糖基结合而成的糖酯,主要有西红花苷I和西红花苷II。西红花苷可以在动物肠道内被水解生成西红花酸,然后被吸收进入血液循环(Asai et al.,2005;陈阳等,2010)。西红花苷和西红花酸具有广泛的药理活性,如抑制肿瘤细胞(Tseng et al.,1995;Chryssanthi et a1.,2007;Magesh et a1.,2006),抗氧化(陈阳等,2010;方志凯等,2007;Gong et a1.,2001),心肌损伤修复(Zhang et al.,2009;韩潇媛等,2009),改善睡眠(Kuratsune et al.,2010)等,具有较好的应用前景。

西红花苷的测定方法主要有分光光度法、薄层扫描法和高效液相色谱法(李顺旭等,2010;何常明等,2006),其中高效液相色谱法为2010版中国药典采用的方法。西红花酸的测定方法主要有高效液相色谱法(刘同征等,2002)和高效液相色谱法质谱联用法(Park et al.,2001)。本文建立了反相高效液相色谱法同时测定西红花苷I和西红花酸的方法,对西红花酸生产过程的控制有一定实际应用价值。

图1 西红花酸结构式Fig.1 The structure of crocetin

1 实验部分

1.1 仪器、试药与材料

LC-20AT/SPD-10A高相液相色谱仪(日本岛津);N2000色谱数据工作站(浙江大学智达信息工程有限公司);C8 柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm,大连依利特);TU-1810PC紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司);电子分析天平(上海舜宇恒平科学仪器有限公司)。

西红花苷I对照品(中国药品生物制品检定所);西红花酸对照品(Carotenature公司,瑞士);甲醇(色谱纯,上海陆都化学试剂厂);其他试剂均为分析纯。……

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