防治人参土传病害生防菌株X1和B59培养基筛选及发酵条件的优化研究1)
2012-09-27姜竹张云湖孟利强曹旭李晶
中国林副特产 2012年5期
关键词:生长
姜竹,张云湖,孟利强,曹旭,李晶*
(1.黑龙江护理高等专科学校,哈尔滨150086;2.黑龙江省生物工程重点实验室,黑龙江科学院微生物研究所,哈尔滨150010)
人参为五加科名贵中药材。土传病害是制约人参产量和质量的主要因素之一,在我国每年由于土传病害所造成的产量损失可达20%~50%,并且严重地削弱了我国人参产品在国际市场上的竞争能力。利用生防菌防治人参土传病害是一种高效、安全的植保新途径。近年对人参土传病害的生防研究主要集中在木霉菌的筛选和利用[1-4]。笔者从患病人参根际土中筛选获得两株对人参土传病菌具较强拮抗作用的生防菌株B59和X1[5],通过对两菌株的发酵培养基、最佳发酵条件的研究,为其开发利用奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌株。生防菌株X1和B59由黑龙江省生物工程重点实验室分离、鉴定并保存。
1.2 方法
1.2.1 种子液制备 。将保存于-70℃的细菌菌株转接到装有5mL NYD培养基的试管中,37℃,150r/min振荡培养18h。将培养好的菌株划线到NYDA平板上,37℃培养箱中过夜培养18h。挑取单菌落再次接种到装有5mL NYD试管培养基中,37℃,150r/min振荡培养18h。
1.2.2 培养基成分的优化
(1)不同种类碳源对X1和B59菌株生长的影响。分别用1%葡萄糖、可溶性淀粉、玉米淀粉和蔗糖等量替代基础发酵培养基中的葡萄糖制成培养基。每种培养基中接种量为1%,37℃、160r/min摇床培养18h,采用可见分光光度计测定发酵液OD600值,用无菌相应的培养液稀释3倍,以相应的无菌培养基为空白对照,重复3次。
(2)不同种类的氮源对X1和B59菌体生长的影响。……
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