任 鸿

（山西中医学院附属医院外科，山西太原030024）

大肠癌Cyclin D1多态性及相关细胞周期蛋白表达的研究

Polymorphism of Cyclin D1 and Expression of Cell Cycle Related Genes in Colorectal Carcinoma

任 鸿

（山西中医学院附属医院外科，山西太原030024）

目的：研究大肠癌中Cyclin D1基因DNA序列的多态性及其相关的细胞周期调控蛋白的表达水平。方法：取55例大肠癌患者手术切除标本，抽提病变组织中的基因组DNA，另取24例非癌症切除的正常组织作为正常对照。通过PCR扩增Cyclin D1的4号外显子的基因组DNA片段，并进行限制性片段长度多态性分析，统计Cyclin D1第242号密码子多态性的分布比例。以Western Blot方法，在蛋白质水平检测相应组织中Cyclin D1，Cdk6和pRb的表达水平及磷酸化水平。将检测结果以光密度值进行半定量，对比各组不同的Cyclin D1基因型对相关蛋白表达的影响。结果：在55例大肠癌中，有12例（21.8%）的基因型显示为GG；有24例（43.6%）的基因型显示为AG；有19例（34.5%）的基因型显示为AA。当其基因型为AA和AG时，Cyclin D1表达水平和pRb磷酸化水平要显著高于基因型为GG的标本（P<0.01）。一般GG型的肿瘤组织中Cyclin D1的表达水平和pRb磷酸化水平与正常组织无显著性差异；而AA和AG型的肿瘤组织中，Cyclin D1的表达水平则分别可以达到正常组织的（4.87±2.38）倍和（3.43±1.74）倍。病理学检测显示多数AA和AG型大肠癌的肿瘤分级也显著高于GG型的标本（P<0.05）；但肿瘤分期的差异无统计学意义（P>0.05）。结论：大肠癌中Cyclin D1基因第242号密码子具有多态性。Cyclin D1的等位基因多态性在很大程度上影响了pRb的磷酸化水平，与大肠癌病理分级以及预后有密切联系。

大肠癌；细胞周期素D1；等位基因；多态性

Cyclin D1属于细胞周期调节蛋白，在调控正常细胞周期过程中起重要作用［1］。当其基因突变引起过度表达时，往往有助于肿瘤的形成［2］，特别是发生了G→A转换的Cyclin D1基因所表达的蛋白质具有更长的半衰期，使其在细胞内的作用时间延长，破坏了细胞周期的平衡［3］。本研究对大肠癌组织中Cyclin D1基因多态性进行分析，并检测Cyclin D1基因的表达及其相关的细胞周期调控蛋白的水平，阐明Cyclin D1基因对大肠癌的影响。……