杨朋艳，梁晚枫，张守发，贾立军

（延边大学农学院动物医学系，吉林延吉133002）

附红细胞体病（Eperythrozoonosis）简称附红体病，是由附红细胞体（Eperythrozoon）感染机体后，附着于人和动物红细胞表面或游离于血浆及骨髓中所引起的人兽共患的传染性疾病。该病多为隐性感染，急性发病时以发热、贫血和黄疸为主要临床表现。我国是目前该病流行最为严重的国家之一，相继报道本病流行的省、市、自治区已有20多个［1］。该病不仅导致畜产品质量和产量降低，动物生育能力下降，而且还可导致动物出现严重的临床症状，甚至死亡［2］，已经对畜牧业发展及人类健康构成了严重威胁，是一种亟待控制的传染病［3］。本研究对自然感染猪附红细胞体长白仔猪进行了血液学指标和血清生化指标的测定，以期为该病的临床诊断和防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样本 采自延边某猪场，35日龄左右的长白仔猪20头。

1.1.2 试剂 r Taq DNA 聚合酶、DNA Marker、DNA提取试剂盒等均为宝生物工程（大连）有限公司产品。

1.2 方法

1.2.1 病原体鉴定

1.2.1.1 姬姆萨染色 颈静脉无菌采集仔猪血液抗凝剂抗凝，滴1滴于洁净的载玻片上，抹片，自然干燥后，甲醇固定，姬姆萨染色12 h，镜下观察猪附红细胞体的感染情况。

1.2.1.2 PCR检测 根据GenBank中登录的猪附红细胞体膜蛋白OxaA序列（CBZ40902.1），应用Primer Premier 5.0和 Oligo 6.0软件设计引物，上游引物 P1：5′－TCTTATGTCTTTGTTGTAAATCTG－3′；下游引物P2：5′－TTTTCAATCTATGTTCACCTCA－3′。扩增片段大小386 bp。扩增程序为：95℃预变性5 min；94℃45 s，57℃45 s，72℃45 s，共30个循环；72℃延伸7 min，4℃结束反应。PCR产物经10 g／L琼脂糖凝胶电泳检测结果。

1.2.2 血液学指标的测定 使用全自动动物血液细胞分析仪，按常规方法进行检测。……