孙 震，冯才伟，李 勇，吴 鹏，冯 静，韩京朋

（北京勤邦生物技术有限公司，北京102206）

呕吐毒素（vomitoxin），又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON），化学名称为3α，7α，1，5－三羟基草镰孢菌－9－烯－8－酮，属单端孢霉烯族化合物［1－2］。单端孢霉烯族毒素共有150多种，是一类强有力免疫抑制剂，所引起典型症状是采食量降低，所以这类毒素又叫饲料拒食毒素，DON是其中最重要一种毒素［3－4］。

DON主要来自镰刀菌属（Fusarium），尤其是禾谷镰刀菌（Fusarium grarninearum）和黄色镰刀菌（Fusarium culmorum），其结构为四环倍半萜，分子式为 C15H20O6，分子质量296.3 ku［5－6］。其结构式如下（图1）：

图1 DON化学结构式Fig.1 DON chemical structure

由于DON具有很高的细胞毒性及免疫抑制性，因此，对人类及动物的健康构成了威胁。1998年，在国际癌症研究机构公布的评价报告中，呕吐毒素被列为3类致癌物［7］。国际上对呕吐毒素的检测方法研究进展较快。先后出现了薄层色谱法和高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、酶联免疫（ELISA）的检测方法［8］。目前国内用于DON检测的ELISA试剂盒很少，而实现商品化的更少。本研究期望通过研究制备出抗DON的高效价、高特异性单克隆抗体，并最终开发出可用于食品中DON检测的酶联免疫检测产品。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 DON为上海安普科学仪器有限公司产品，牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（OVA）为Sigma公司产品；3，3′，5，5′－四甲基联苯胺（TMB）、戊二醛、马来酸酐、4－二甲氨基吡啶（DMAP）1－乙基－（3－二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）、二甲基甲酰胺（DMF）为国药集团化学试剂有限公司产品；辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠二抗为美国Jackson公司产品；弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂为北京勤邦生物技术有限公司产品，细胞培养基RPMI－1640为Hyclone公司产品，其他有关化学试剂均为分析纯。……