孙远征,王明明,卫哲,马俊

(1.黑龙江中医药大学附属第二医院,哈尔滨 150001;2.黑龙江中医药大学,哈尔滨 150040)

电针已成为戒毒的有效治疗方法,中脑边缘多巴胺系统(MLDS)参与成瘾机制,是与学习、记忆、情感及行为学相关的重要结构。药物成瘾可对成瘾者的学习记忆能力造成一定损害[1]。研究证实 Ca2＋-CaM-CaMK信号转导通路在吗啡成瘾中起到重要作用[2],本实验采用水迷宫训练来观察电针对吗啡戒断大鼠学习记忆的改善,并从中脑VTA水平检测CaMKⅡ的活性,深入研究电针抗吗啡戒断的中枢神经系统机制。

1 材料和方法

1.1 实验对象与分组

雄性SD大鼠48只,体重(190±30)g,清洁级,由黑龙江中医药大学动物实验中心提供,适应性喂养 1星期后随机分组,分为生理盐水对照组(对照组),吗啡戒断模型组(模型组),电针治疗组(电针组),艾灸治疗组(艾灸组),共4组,每组12只。

1.2 试剂和仪器

盐酸吗啡(沈阳第一制药厂),盐酸纳洛酮(成都倍特药业有限公司),戊二醛(上海生物工程有限公司),多聚甲醛(分析纯,上海溶剂厂),免疫组化检测试剂盒(PV-6001)(北京中杉金桥生物技术有限公司);KWD808Ⅱ脉冲治疗仪,Morris水迷宫。

1.3 造模

参考相关文献[3]进行造模,除对照组外,每组采用逐日递增法连续5 d背部皮下注射吗啡,建立吗啡依赖大鼠模型,每日 2次(8 Am、4 Pm),每日剂量为 20 mg/kg、30 mg/kg、40 mg/kg、50 mg/kg、50 mg/kg。末次注射吗啡后3 h腹腔注射纳洛酮(3 mg/kg)快速戒断,立即将大鼠置于 3000 mL大烧杯中,记录 10 min内大鼠的湿狗样抖动、站立、扭体、洗脸等次数以及齿颤、上睑下垂、激惹和体重下降等不可数戒断症状反应,戒断症状反应参照 Maldonade[4]的方法,根据评分标准进行评分,与已建立的吗啡戒断大鼠模型标准比较,确定模型建立成功。……