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高产S-腺苷蛋氨酸的酿酒酵母发酵条件的响应面法优化

2012-09-25朱靖博,宋青楠,耿慧琴,许芹永

大连工业大学学报 2012年5期
关键词:产量实验设计

朱 靖 博, 宋 青 楠, 耿 慧 琴, 许 芹 永

( 1.大连工业大学 食品学院, 辽宁 大连 116034; 2.大连博迈科技发展有限公司, 辽宁 大连 116034 )

0 引 言

S-腺苷蛋氨酸(SAM)有“活性甲硫氨酸”之称,于1953年被Cantoni[1]发现。SAM作为人体内最重要的甲基供体,在生命活动中,使得许多重要物质如核酸、蛋白质、脂类、碳水化合物等甲基化。SAM还是转甲基反应、转硫反应和多胺合成反应的促进剂。目前SAM的生产方法主要有化学合成法、酶促转化法、发酵法。化学合成法产率低,底物价格昂贵,产物易发生消旋,已经很少使用[2]。酶促转化法是利用SAM合成酶催化L-蛋氨酸和ATP合成SAM[3],由于细胞中SAM合成酶分离纯化困难,因此酶促法也无法应用于工业生产。发酵法成本低,易于实现,是目前工业化生产的主要手段。国外对发酵法制备SAM进行了较多的研究[4],并已实现产业化。而国内对SAM制备技术的研究起步较晚,发酵水平远低于国外。

酿酒酵母具有较强的SAM胞内积累能力,是目前工业化生产的主要菌株。本文通过对本实验室保存的酿酒酵母积累SAM能力进行考察,并对其发酵条件进行优化,提高了SAM的产量。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

酿酒酵母,菌株编号F2103,大连工业大学食品发酵微生物菌种保藏中心。

1.2 培养基

(1)固体培养基(YEPD):葡萄糖20 g/L,蛋白胨20 g/L,酵母粉10 g/L,琼脂20 g/L。

(2)种子液培养基:葡萄糖20 g/L,蛋白胨20 g/L,酵母粉10 g/L,校正至pH=6。

(3)发酵培养基:葡萄糖20 g/L,酵母粉5 g/L,硫酸铵5 g/L,磷酸二氢钾6 g/L,磷酸氢二钾3 g/L,硫酸镁1.5 g/L,L-蛋氨酸1 g/L,校正至pH=6。

1.3 培养条件

种子液制备:挑取一环菌种,接入装有30 mL种子培养基的250 mL三角瓶中,于28 ℃、180 r/min 条件下培养24 h。……

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