李 慧 顾 健 林传明 顾 薇 沈连军

1.江苏省苏北人民医院风湿免疫科，江苏扬州 225001；2.江苏省苏北人民医院血液科 扬州市血液学研究所，江苏扬州 225001

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是以累及周围性小关节为主的系统性、炎症性自身免疫疾病，以关节滑膜细胞增生、炎症细胞浸润及血管翳形成为主要病理特征[1]。脐带间充质干细胞 （umbilical cord mesenchymal stem cells，UCMSC）是来源于脐带华通氏胶的一类多能干细胞，具有独特的免疫调节功能，以抑制炎性反应为主要特征。本文以胶原诱导型关节炎（CIA）大鼠为研究对象，观察UC-MSC对CIA大鼠炎症细胞因子的调节作用，为临床应用UC-MSC治疗RA提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

5 周龄，雌性，清洁级 SD 大鼠，90 只，平均体重（175±10）g，购置于南京大学模式动物研究所。

1.2 实验方法

1.2.1 CIA大鼠模型建立 ①分组:90只SD大鼠随机分为三组:空白对照组、模型组、UC-MSC治疗组，每组各30只；②造模:扬州大学医学院实验动物中心清洁级环境中适应性饲养1周，模型组及UC-MSC治疗组在乙醚麻醉下于第1天以每只0.1 mL（含鸡Ⅱ型胶原0.25 mg及0.05 mL完全弗氏佐剂）于SD大鼠右后足跖皮内注射，至第21天同前剂量于大鼠尾根部、左后足跖皮内再次多点激发免疫。空白对照组以生理盐水注射，方法同造模组。

1.2.2 UC-MSC移植 取融合度 85%的 P3代 UC-MSC，用0.25%胰蛋白酶消化，生理盐水清洗3遍，制成浓度为2×106/mL细胞悬液，用1 mL无菌注射器抽吸分装成0.5 mL/支（含1×106个细胞）。于造模完成后1周经大鼠尾静脉注射制备好的UC-MSC悬液0.5 mL/只；空白对照组及模型组同法注射等量生理盐水。

1.3 观察指标

1.3.1 从免疫当日起，采用双人双盲的方式在初免后1、2、3周，及治疗后1～5周，每周观察并采用关节炎指数（AI）评分法评定大鼠关节症状的严重程度。……