曲 巍 刘 锋 姬西宁 王立明 朱有华

1.解放军第一六一医院泌尿外科，湖北武汉 430010；2.第二军医大学附属长征医院器官移植研究所，上海 200003

膀胱癌是最常见的恶性肿瘤之一，每年有350000例以上的新发病例，并且有145 000 人死于此病[1]。其生物学行为呈多样性，而容易复发是其重要生物学特性。目前对其发生、复发、浸润及转移的机制尚未完全明了，大部分膀胱癌在确诊时是表浅性的，经过局部手术治疗后复发率为50%～70%，进展率为15%～30%。现有的传统抗肿瘤药物治疗尚有一定的局限性，从新的角度寻求有效的抗肿瘤药物有望取得突破性进展。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deactylase inhibitors，HDAC抑制剂）是一类通过抑制组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）而改变染色质结构，在转录水平进行基因表达调控的化合物，依其化学结构可分为六类，而MS-275 是苯酰胺类HDAC抑制剂中最具活性的一种化合物，其显示出对一些血液系统肿瘤[2]和实体肿瘤[3]有较强的抗肿瘤活性。本实验将探讨MS-275 对膀胱癌细胞的诱导凋亡作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 细胞培养

人膀胱癌T24 细胞来源于中国科学院上海生物细胞研究所，实验时取对数生长期的细胞，在含10%小牛血清的细胞培养基（DMEM）培养液中培养，在 37℃、5%CO2、饱和湿度条件下生长，0.25%胰蛋白酶消化传代。

1.2 MTT实验

T24 细胞以 5 ×104/mL、100 μL/孔， 接种于 96 孔培养板，培养 24 h 后，分别加入浓度为 0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 μmol/L的MS-275 作为5个实验组，阴性对照组不加MS-275，空白对照组为单纯DMEM培养液，每组各设5个复孔。继续培养48 h，每孔加入5 g/L的MTT溶液10 μL，再培养 4 h，吸出孔内培养液，每孔加100 μL二甲基亚砜（DMSO），酶标仪测定吸光度，选择492 nm波长，用空白对照组调零，计算细胞生长抑制率（%）＝（1-实验组吸光度/对照组吸光度）×100%。……