高效液相色谱法测定大鼠血清中盐酸柔红霉素浓度

2012-09-17冯碧敏陈丽娟

中国药业 2012年2期

关键词：血清

冯碧敏，陈丽娟，叶云

(泸州医学院附属医院药剂科，四川泸州 646000)

柔红霉素是治疗急性白血病的基本用药，是一种强效蒽环类抗肿瘤抗生素，最严重的毒副反应是心脏毒性和骨髓抑制。因其对患者的心脏功能有严重影响，甚至对患者的生命构成威胁，限制了其临床应用。研究显示，其所致心脏毒性存在明显的剂量－效应关系。为此，笔者建立了测定血清中柔红霉素浓度的高效液相色谱法，为进一步研究奠定基础。

1 仪器与试药

Diones Ultimate 3000型高效液相色谱仪(美国戴安公司);Kromasystem 2000型工作站(Bio.Tek Instrument Snl公司);AE 240型电子天平(瑞士Mettler公司);AS10200型超声波清洗器(天津奥特塞恩斯仪器有限公司)。注射用盐酸柔红霉素(Pharmacia公司，批号为8F1005－A，规格为20 mg/支);柔红霉素对照品(中国药品生物制品检定所，批号为130559－200501，含量为91%);多柔比星对照品(中国药品生物制品检定所，批号为130509－200301，含量为97.4%);甲醇(批号为 10071753)，乙腈(批号为 10071743)均来自Honeywell Burdick Jackson，公司;重蒸馏水。血样，SD大鼠在试验前适应性喂养3 d，全程不禁饮水;空白大鼠血清自空白大鼠股动脉处取血，样品血清自大鼠断尾处取血。将采集的全血静置30 min后，离心(3000 r/min)15 min，分取血清，于低温冰箱－20℃存放、待用。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适用性试验

色谱柱:Phenomenex C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);紫外检测波长:233 nm;流速:1.0 mL/min;流动相:甲醇－ 0.01 mol/L 磷酸二氢铵溶液(稀磷酸调节 pH 至4.65)－冰醋酸(30∶20∶0.1)，过滤并脱气;柱温:35℃;进样量:20 μL;内标:多柔比星。在此条件下，柔红霉素、内标出峰时间分别为 9.67，6.03 min，且无杂峰干扰测定。色谱图见图1。