刘 凯，刘逸寒，张 艳，田 耀，路福平

(工业发酵微生物教育部重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津 300457)

枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转氨酶的异源表达

刘 凯，刘逸寒，张 艳，田 耀，路福平

(工业发酵微生物教育部重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津 300457)

以野生型枯草芽孢杆菌基因组DNA为模板，PCR扩增获得带有SD序列及谷氨酸棒状杆菌信号肽ΔS0949的BTG基因．将其与大肠杆菌–谷氨酸棒状杆菌穿梭表达载体pXMJ19连接，构建重组质粒pXMJ19-Sbtg转化谷氨酸棒状杆菌ATCC13032．经IPTG诱导后该重组菌发酵液具有交联酪蛋白的能力，表明该重组菌能够实现分泌表达．

谷氨酰胺转氨酶；谷氨酸棒状杆菌；信号肽；分泌表达

谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase，EC 2.3.2.13，简称TG或TGase)是一种催化酰基转移反应的转移酶．TG作为酰基受体与蛋白质中的赖氨酸残基的ε–氨基作用，形成ε–(γ–谷氨酰)Lys键，催化蛋白质分子内和分子间发生交联、蛋白质和氨基酸之间的连接以及蛋白质分子内谷氨酰胺基的水解反应，从而改善蛋白质功能性质，提高蛋白质的营养价值，在肉制品、鱼类制品、豆制品、面食和乳制品等食品加工业以及纺织和生物制药等领域有着广泛的应用前景[1–6]．

目前，食品工业中谷氨酰胺转氨酶的主要生产方法是通过茂源链霉菌(Streptomyces mobaraensis)直接发酵获得，由于酶活收率较低(仅为37%)[7]使其价格居高不下．虽然以日本的味之素公司科研人员为代表的中外学者对茂源链霉菌谷氨酰胺转氨酶(Streptomyces mobaraensis transglutaminase，MTG)进行了大量研究，发现使用谷氨酸棒状……